天然多糖體外抗氧化活性研究.pdf

1、人體內(nèi)的活性氧自由基,具有強(qiáng)烈的引發(fā)脂過氧化的作用,進(jìn)而誘發(fā)氧化失衡引起多種疾病。天然多糖是具有一定抗氧化活性的物質(zhì),其用作抗氧劑較化學(xué)合成藥品而言具有無毒、生物相容性良好等優(yōu)點(diǎn),但有關(guān)天然多糖抗氧化活性與機(jī)理的研究仍處于探索階段。鑒于此,本論文針對(duì)植物來源的菊糖(In)、動(dòng)物來源的殼聚糖(Cs)和真菌來源的靈芝多糖(Glp)開展體外抗氧化活性的化學(xué)評(píng)價(jià)和細(xì)胞評(píng)價(jià),研究不同來源、不同結(jié)構(gòu)天然多糖的抗氧化活性的構(gòu)效關(guān)系、從細(xì)胞分子水平揭示

2、其可能的抗氧化或調(diào)節(jié)過氧化的機(jī)理。
　　首先采用體外化學(xué)評(píng)價(jià)法,以抗壞血酸(Vc)為對(duì)照組,研究了In、Cs和Glp清除DPPH自由基、超氧陰離子自由基(O2―?)和羥基自由基(?OH)的能力;采用紅外光譜(IR)和高效凝膠滲透色譜(GPC)表征了三種天然多糖的結(jié)構(gòu)和相對(duì)分子質(zhì)量;分析了天然多糖清除自由基的能力與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系,并討論了化學(xué)評(píng)價(jià)法自由基體系的穩(wěn)定性和適用性。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:三種天然多糖對(duì)DPPH清除率的大小

3、順序?yàn)閂c>Cs>In>Glp,該種自由基測(cè)定方法簡(jiǎn)單易行,清除能力與天然多糖的結(jié)構(gòu)密切相關(guān);O2―?清除率的大小順序?yàn)镮n>Glp>Cs>Vc,該評(píng)價(jià)體系中顯色劑會(huì)與Vc和Cs發(fā)生反應(yīng),評(píng)價(jià)結(jié)果存在一定誤差;?OH清除率的大小順序?yàn)?Vc>Cs>In>Glp,但Vc后期會(huì)促進(jìn)?OH的生成,而In、Cs和Glp可以抑制其生成。
　　其次,采用體外細(xì)胞評(píng)價(jià)法,以Vc為參照物,分別從細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞活力、細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活

4、性、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)活性等指標(biāo)來研究天然多糖不同劑量對(duì)正常HepG2細(xì)胞的毒性作用并討論了天然多糖對(duì)氧化受損HepG2細(xì)胞干預(yù)24h后的修復(fù)效果。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:采用50μM的H2O2作用HepG2細(xì)胞2h條件進(jìn)行細(xì)胞造模,此時(shí)細(xì)胞存在一定損傷但又具有可修復(fù)性。原材料天然多糖和參照物Vc對(duì)正常細(xì)胞沒有毒性,且能夠修復(fù)氧化損傷細(xì)胞形態(tài)和提高細(xì)胞活力。其中Vc中劑量組、In低劑量組、Cs中劑量