內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與雙酚A導(dǎo)致的肝細(xì)胞凋亡.pdf

1、目的：雙酚 A(Bisphenol-A，BPA)是一種最常見(jiàn)的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì)。近年來(lái)研究提示BPA與肝功能失調(diào)和肝臟疾病如肝臟脂質(zhì)沉積、代謝綜合征密切相關(guān)，而肝細(xì)胞凋亡異常是這些疾病發(fā)病機(jī)制之一。BPA是否通過(guò)影響肝細(xì)胞凋亡參與肝臟疾病的發(fā)生并不清楚，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否參與其中也尚未報(bào)道。本研究旨在探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在BPA導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡中的作用。
　　方法：不同濃度BPA（0、0.01、10μmol/L）干預(yù)HepG2細(xì)胞，流式細(xì)胞

2、術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。另將48只雄性CD1小鼠隨機(jī)分成4組（12只/組），分別予以含不同濃度 BPA（0、5、50、500μg/(kg/d)）的標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)8周后，利用HE染色觀察肝臟組織形態(tài)學(xué)改變、Hoechst33258染色觀察細(xì)胞凋亡情況，western blot法檢測(cè)肝臟組織中凋亡相關(guān)指標(biāo)Cleaved Caspase3、Bax、Bcl-2的蛋白表達(dá)，采用分光光度法測(cè)定Caspase3酶活性。另外，Western blot法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)

3、網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)標(biāo)志物Bip、IRE1α、PERK、eIF2α和SREBP-1c等蛋白及其磷酸化的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：相比對(duì)照組，BPA干預(yù) HepG2細(xì)胞顯示細(xì)胞凋亡率明顯增多。與對(duì)照組相比，BPA各干預(yù)組小鼠肝臟組織中凋亡小體明顯增多，肝臟組織促凋亡基因Cleaved Caspase3與Bax蛋白表達(dá)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），抗凋亡基因Bcl-2蛋白含量無(wú)明顯變化；Caspase3酶活性顯著增強(qiáng)（P<0.05）。BP