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文檔簡介
1、目的及意義:
研究證實鑭具有抗菌、抗腫瘤、促進正常細胞增殖和調(diào)節(jié)免疫的效果。我們前期實驗結(jié)果表明在一定濃度范圍的氯化鑭具有抑制宮頸癌細胞、促進正常細胞增殖的作用,本研究旨在構(gòu)建一款可降解納米纖維支架來承載氯化鑭,并比較不同濃度氯化鑭納米纖維支架的表面特性及生物相容性,為稀土鑭化合物轉(zhuǎn)化應用于相關(guān)疾病的治療提供實驗室基礎(chǔ)和手段。
研究內(nèi)容和方法:
1、聚己內(nèi)酯/明膠/氯化鑭(PCL/GE/LaCl3)復合納米
2、纖維支架的構(gòu)建:靜電紡絲技術(shù)條件與配方優(yōu)化:以1,2-二氯乙烷,無水乙醇,甲酸為溶劑,在最佳靜電紡絲條件下使用靜電紡絲技術(shù)分別構(gòu)建聚己內(nèi)酯/明膠(PCL/GE)復合納米纖維支架以及含有不同濃度氯化鑭(LaCl3)溶液的聚己內(nèi)酯/明膠/氯化鑭(PCL/GE/LaCl3)復合納米纖維支架。最終制得含氯化鑭濃度分別為0mmol/L、0.392mmol/L、0.785mmol/L、1.570mmol/L、及3.140mmol/L的復合納米纖維支
3、架五張(分別定義為空白組、0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組及3.140mmol/L組)。
2、材料的理化性質(zhì)鑒定:掃描電鏡觀察、孔隙率測定、靜態(tài)接觸角分析、材料降解率測定等試驗對上述五種纖維支架的理化性能進行表征。
3、生物安全性評價:根據(jù)相關(guān)國家標準采用體外細胞毒性實驗評價各組納米纖維支架的生物安全性。
4、組織相容性分析:
(1)采用四甲基偶氮唑鹽微
4、量酶反應(MTT)法檢測各納米纖維支架上細胞的增殖情況。
(2)細胞在支架上的生長情況:運用熒光顯微鏡技術(shù)觀察脂肪干細胞在納米纖維支架上的生長情況。
結(jié)果:
1、成功構(gòu)建了含不同濃度的氯化鑭的納米纖維膜,掃描電鏡下可見:空白組、0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組納米纖維支架均形成了較為連續(xù)、均一的纖維,且呈現(xiàn)出兩種纖維交錯分布的結(jié)構(gòu)。隨著LaCl3濃度的提高,纖維開
5、始變細;當LaCl3的濃度為3.140mmol/L時,纖維細絲雜亂明顯。與空白組相比,加入不同濃度氯化鑭的各組納米纖維支架纖維均未見明顯顆粒存在。
2、理化性能表征測試顯示:空白組、0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組、及3.140mmol/L組納米纖維的平均直徑分別為315±104nm、291±96nm、285±143nm、308±129nm和267±197nm,纖維均為納米級別。各組
6、納米纖維支架的孔隙率由高到低依次為:0.785mmol/L組>0.392mmol/L組>空白組>1.570mmol/L組>3.140mmol/L組,五組纖維支架均具有高孔隙率的特性;靜態(tài)接觸角分析顯示各組納米纖維支架的接觸角均為0,材料的親水性良好;體外降解實驗表明:在第一周內(nèi),各組納米纖維材料均有接近50%的失重率;隨著時間的增加,失重率明顯增加;在7周內(nèi)材料的失重率均接近90%。
3、納米纖維材料的生物安全性:通過細胞毒性
7、測試分析表明PCL/GE、含不同濃度LaCl3的各組PCL/GE/LaCl3復合納米纖維支架均無細胞毒性,生物安全性良好。
4、組織相容性分析結(jié)果如下:MTT分析顯示:第2天,各組細胞的增殖率無明顯差異,第4-8天,0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組細胞的增殖率顯著高于空白組和3.140mmol/L組,各組細胞在PCL/GE/LaCl3復合納米纖維材料上的增殖率均高于不含LaCl3的P
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