TCF21對肝癌細(xì)胞株SMMC-7721的侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、目的:肝細(xì)胞性肝癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）是一種常見的全球范圍非常高死亡率的惡性腫瘤。轉(zhuǎn)錄因子21（transcription factor21, TCF21）是一個近年來新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，位于6q23.2，它被發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤組織中被甲基化而抑制失活。已有相關(guān)文獻(xiàn)報道TCF21在肝癌組織當(dāng)中啟動子高度甲基化而表達(dá)下調(diào)，在正常肝組織當(dāng)中相對高表達(dá)。本研究將探討 TCF21(Transcription f

2、actor21)基因?qū)Ω渭?xì)胞肝癌細(xì)胞系SMMC-7721細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法:采用脂質(zhì)體將pcDNA3.1(+)TCF21及pcDNA3.1(+)質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入SMMC-7721細(xì)胞，分別為TCF21轉(zhuǎn)染過表達(dá)組、空載體組、未處理組。采用反轉(zhuǎn)錄PCR檢測轉(zhuǎn)染前后TCF21 mRNA水平、Western blot法檢測TCF21蛋白水平；MTT法檢測細(xì)胞的增殖能力，劃痕實驗檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞的遷移能力；異

3、硫氰酸熒光素標(biāo)記的膜聯(lián)素Ⅴ/碘化丙啶（annexinⅤ-FITC/PI）結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率，Western blot法檢測KISS1、P53和基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）的蛋白水平。
　　結(jié)果: TCF21基因轉(zhuǎn)染SMMC-7721細(xì)胞后，TCF21在基因和蛋白水平均呈現(xiàn)高表達(dá)。MTT結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染過表達(dá)組增殖能力較對照組減弱；劃痕實驗結(jié)果示TCF21能顯著抑制瘤細(xì)胞的遷移能力(P<0.01)；流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染過表達(dá)