中華絨螯蟹性腺抑制激素純化及其免疫定位的研究.pdf

1、X器官-竇腺復合體（X organ-sinus gland system，XO-SG）是位于甲殼動物眼柄內視上神經(jīng)節(jié)中的重要內分泌器官。它合成和分泌甲殼動物高血糖素（Crustacean hyperglycemic hormone，CHH）、蛻皮抑制激素（Molt-inhibiting hormone，MIH）、性腺抑制激素（Gonad-inhibiting hormone，GIH）和大顎器抑制激素（Mandibular organ-i

2、nhibitinghormone，MOIH）等多種神經(jīng)類多肽激素，這些激素同屬于CHH家族，具有相似的性質和一級結構。
　　 中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）在各地養(yǎng)殖過程中普遍發(fā)生一齡蟹性早熟現(xiàn)象，給經(jīng)濟生產(chǎn)帶來了巨大的損失。研究發(fā)現(xiàn)中華絨螯蟹性腺抑制激素的分泌和代謝失調與其性早熟有著密切的關系。由于河蟹眼柄視上神經(jīng)節(jié)中神經(jīng)多肽激素的合成很少，性腺抑制激素在X器官-竇腺復合體中的含量極低，給分離、純化工作帶來

3、了一定的困難。
　　 本試驗采用高效液相色譜反相層析法（RP-HPLC）分離中華絨螯蟹眼柄視上神經(jīng)節(jié)的激素蛋白提取液，收集其在高血糖激素家族區(qū)域內出峰的組分。通過體內注射的方法，檢驗每個分離組分的性腺抑制活性，發(fā)現(xiàn)洗脫液在38-40mL處時收集到的峰物質具有最強的性腺抑制活性。進一步純化后，利用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（MOLDI-TOF-MS）測量出其分子量為6800 u。由于此蛋白或多肽在反向層析中處于高血糖激素家族