背俞穴埋線干預(yù)慢性疲勞綜合征大鼠的作用機制研究.pdf

1、目的:
　　慢性疲勞綜合征(chronic fatigue syndrome，CFS)是以持續(xù)疲勞、活動減少為主要表現(xiàn)的全身性綜合征，持續(xù)時間≥6個月，伴有咽喉痛、頭痛、肌肉關(guān)節(jié)疼痛、淋巴結(jié)腫大和壓痛、低熱（或自覺發(fā)熱）、睡眠障礙、記憶力差、抑郁以及多種神經(jīng)精神癥狀，臥床休息不能緩解，而各項體格檢查和實驗室檢查均無明顯異常。但目前國內(nèi)外對其病因病機尚未研究透徹，考慮可能與病毒感染、神經(jīng)內(nèi)分泌紊亂、自身免疫功能異常、遺傳等因素有關(guān)。

2、目前流行病學(xué)研究表明慢性疲勞綜合征在人群中的患病率正在遂年增加。美國CDC預(yù)測CFS將成為21世紀(jì)影響人類健康的主要問題之一。CFS的高流行率給個人、家庭和社會帶來不可低估的損害，已引起國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界及社會的積極關(guān)注。
　　性疲勞綜合征在中醫(yī)學(xué)中，應(yīng)屬于傳統(tǒng)病名中的“虛勞”、“百合病”、“臟躁”、“郁證”等。慢性疲勞綜合征在臨床上最重要的表現(xiàn)形式是長時間的疲倦狀態(tài)，這種疲倦即有生理上的也有精神上的，是多方面受累的綜合性病證，從中醫(yī)的

3、角度來看，慢性疲勞綜合征的病因可以歸結(jié)于先天不足、作息失調(diào)、勞累過度、飲食不節(jié)、情志內(nèi)傷等;而病機則是氣耗過多、氣機紊亂等引起臟腑功能異常、氣化失司、經(jīng)絡(luò)不通，最終導(dǎo)致以脾腎兩臟為主的多臟腑功能異常的病證。
　　背俞穴固然可以調(diào)節(jié)相應(yīng)的臟腑功能，但由于人體臟腑存在表里關(guān)系，相互間的經(jīng)絡(luò)緊密聯(lián)系，表里臟腑之間的經(jīng)脈相互絡(luò)屬，氣血互相輸注，所以對背俞穴進行治療干預(yù)，一方面可以調(diào)節(jié)腧穴對應(yīng)本臟的機能，另一方面也對互為表里的臟腑功能進行調(diào)

4、節(jié)，增強人體本身存在的抗病能力和自身調(diào)節(jié)作用，增強人體的免疫功能，使機體臟腑陰陽恢復(fù)平和，最終起到治療慢性疲勞綜合征的作用。而穴位埋線療法是指把一小段可以被人體吸收的縫合線埋植入穴位相應(yīng)位置的皮膚下，這一縫合線在穴位的皮內(nèi)可以起到對穴位的長期的連續(xù)的刺激效應(yīng)，從而發(fā)揮穴位的特異性來治療疾病。
　　本研究采用動物實驗的方法，對背俞穴埋線治療慢性疲勞綜合征大鼠的作用效應(yīng)進行了探討，希望找到其起效作用機制，并為臨床推廣使用本療法提供理論

5、依據(jù)。
　　方法:
　　采用3月齡SPF級SD大鼠40只，體重160-180g，雌雄各半，根據(jù)隨機數(shù)字表法將大鼠隨機分為空白組、模型組、穴位埋線組和藥物組，每組雌雄大鼠各5只，共10只。適應(yīng)2天后進行造模。
　　除空白組不作造模處理外其余各組均采用慢性束縛法和強制冷水游泳法隔天交替進行制備CFS大鼠模型，規(guī)定單號日期進行束縛，雙號日期進行冷水游泳，持續(xù)14天?？瞻捉M大鼠在同一環(huán)境中飼養(yǎng)，每日空抓1次，在其余各組造模期間

6、空白組暫不予進食和進水。慢性束縛法:將需造模的三組大鼠均隔天束縛1次，每次束縛的時間不同，隨機確定。束縛時，使大鼠鉆進自制的束縛筒內(nèi)，并調(diào)節(jié)到其不產(chǎn)生強烈反抗的緊張程度，平架在木板上。6分鐘后取出。強制冷水游泳法:準(zhǔn)備兩個游泳池，規(guī)格為185cmx58cmx73cm，游泳時水深為50cm，水溫為14±1℃，將同組雌雄大鼠同時分別置于兩個游泳池中，8分鐘后取出。游泳期間防止大鼠團抱自救或因力竭沉人水中。在每天造模處理后1h內(nèi)開始進行治療處

7、理，每日1次，連續(xù)14天?？瞻捉M、模型組:不進行任何治療處理。
　　穴位埋線組選取以下處方:①第一組:肺俞，心俞;②第二組:肝俞，脾俞，腎俞。進行埋線治療。埋線治療隔天一次，兩組穴位交替進行。藥物組給予人參皂甙水溶液(70mg/kg/d)灌胃治療，每只大鼠每天給予7mg/100g人參皂甙水溶液的標(biāo)準(zhǔn)給藥灌胃治療。兩組治療均連續(xù)14天，每次治療在造模處理后1h進行。
　　每天對大鼠一般情況進行觀察，包括飲水量、進食量、體重以及

8、大鼠糞便情況、鼠毛色澤和瞇眼、耳廓色澤、尾部粗細(xì)和色澤、休息時身體的姿勢等。實驗結(jié)束后檢測行為學(xué)表現(xiàn)（曠場實驗和懸吊實驗），摘除動物的脾臟組織計算脾臟系數(shù)，采集血液分離血清后檢測血清中的細(xì)胞因子IL-1β、IL-6的表達(dá)水平，摘除大腦組織檢測大腦皮質(zhì)BDNF和NGF表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.造模前，各組大鼠的一般情況等均無明顯差異。隨著造模時間的推移，空白組大鼠神態(tài)安靜，時而活潑好動，皮毛光潔整齊，眼睛有神;模型組大鼠

9、飲水量、進食量略有減少，精神倦怠，皮毛失去光澤、稀疏，眼神黯淡無光，體型瘦弱，活動減少，瞇眼明顯，糞便稀，愛扎堆，反應(yīng)力明顯降低。治療組大鼠精神尚可，飲水、進食量較模型組增多，毛色、活動、糞便等較空白組無明顯差異。
　　2.造模第1天，各組大鼠體重?zé)o明顯差異。造模、治療結(jié)束后，模型組大鼠明顯消瘦，體重增加不明顯，與空白組比較，統(tǒng)計學(xué)具有顯著性差異(P＜0.01);穴位埋線組和藥物組大鼠體重增加較模型組明顯，統(tǒng)計學(xué)具有顯著性差異(P

10、＜0.01)，說明模型大鼠體重由于慢性復(fù)合應(yīng)激而致增長緩慢。無論是穴位埋線五臟背俞穴治療還是灌胃人參皂甙水溶液治療，都可以減緩慢性疲勞綜合征模型大鼠的疲勞狀態(tài)，以及改善其體重增長緩慢的表現(xiàn)。
　　3.造模、治療結(jié)束后，模型組與空白組比較，大鼠水平運動次數(shù)和垂直運動次數(shù)均明顯減少，差異具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，穴位埋線組和藥物組大鼠水平、垂直活動次數(shù)均增加，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，說明模型大鼠

11、在新環(huán)境的探究行為減少、情緒抑郁，具有軀體和心理的疲勞，穴位埋線“背俞穴”及人參皂甙治療對其具有明顯的調(diào)節(jié)作用。
　　4.模型組大鼠懸尾后掙扎次數(shù)明顯減少，不動時間明顯長于其它組別，與空白組比較，具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，穴位埋線組和藥物組不動時間有所減少，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，說明慢性復(fù)合應(yīng)激所致的疲勞大鼠體力明顯下降，活動易出現(xiàn)疲勞，有“抑郁”情緒傾向，穴位埋線“背俞穴”及人參皂甙治療對其具

12、有一定的改善作用。穴位埋線組與藥物組實驗大鼠經(jīng)過穴位埋線五臟背俞穴和灌服人參皂甙水溶液的治療干預(yù)后，都可以明顯改善模型大鼠的行為學(xué)測試，可以對模型大鼠生理和心理上的疲勞狀態(tài)產(chǎn)生治療效應(yīng)。
　　5.與空白組比較，模型組大鼠脾臟系數(shù)降低，具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);經(jīng)穴位埋線“背俞穴”、人參皂甙治療后脾臟系數(shù)升高，與模型組比較均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，其中穴位埋線組脾臟系數(shù)升高明顯(P＜0.01)，表明穴位埋線改善慢

13、性疲勞綜合征模型大鼠的脾臟系數(shù)和藥物人參皂甙具有相似的效應(yīng)。
　　6.與空白組比較，模型組IL-1β、IL-6含量升高，差異具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，穴位埋線組、藥物組IL-1β、IL-6水平下降，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，其中IL-1β、IL-6的含量，穴位埋線組的降幅較大(P＜0.01)，兩種治療方法都能減緩模型大鼠體內(nèi)的炎癥反應(yīng)，增加機體免疫抵抗力，從而治療慢性疲勞綜合征。
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14、.與空白組比較，模型組的光密度和陽性面積都明顯要小，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，說明模型組大腦皮質(zhì)的BDNF、NGF表達(dá)水平明顯低于空白組。而穴位埋線組和藥物組的BDNF、NGF光密度和陽性面積則明顯要比模型組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，兩種治療方法都能改善神經(jīng)元損傷，并促進大腦神經(jīng)元結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù)，從而治療慢性疲勞綜合征。
　　結(jié)論:
　　慢性疲勞綜合征的發(fā)病最重要的是先天與后天之本的脾腎兩臟的虧虛，從而引起五臟皆損，五臟功能紊亂。所

15、以治療當(dāng)以調(diào)整機體氣血、補益臟腑功能為大法。本次實驗，在治療干預(yù)上我們選取了五臟背俞穴（即肺俞、脾俞、心俞、肝俞和腎俞）作為埋線的穴位處方。
　　選取五臟背俞穴進行穴位埋線對慢性疲勞綜合征大鼠進行干預(yù)，可以減緩模型大鼠的各種疲勞癥狀和體重增加緩慢的情況，并改善其行為學(xué)表現(xiàn)，增加體能和糾正其抑郁消極的情緒。其內(nèi)在機制可能是背俞穴穴位埋線可以提高模型大鼠的脾臟系數(shù)，增加其自身免疫能力，提高腦組織內(nèi)的神經(jīng)營養(yǎng)因子含量，從整體水平上改善心