熊果酸抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116增殖與Wnt-β-catenin信號(hào)的關(guān)系研究.pdf

1、結(jié)腸癌是常見(jiàn)的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率和致死率均較高。目前對(duì)結(jié)腸癌的診斷和治療水平已有較大提高，但其治療效果及預(yù)后仍不樂(lè)觀(guān)。因此，尋找新的藥物靶點(diǎn)或開(kāi)發(fā)新的治療藥物是目前攻克結(jié)腸癌所面臨的主要任務(wù)之一。熊果酸（Ursolic acid, UA）對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有抗腫瘤作用，但具體機(jī)制尚不清楚。本課題主要分析熊果酸對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖的影響及可能的分子機(jī)制。采用結(jié)晶紫染色、流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR、Western Blot和熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒等實(shí)

2、驗(yàn)方法，首先檢測(cè)UA對(duì)結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞增殖及凋亡的影響。然后檢測(cè)UA對(duì)TGF-β3、p-Smad2/3的表達(dá)影響，在結(jié)腸上皮細(xì)胞及不同的結(jié)腸癌細(xì)胞中TGF-β3的內(nèi)源性表達(dá)情況，并檢測(cè)了外源性過(guò)表達(dá)或抑制TGF-β3對(duì)UA抑制結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116增殖的影響。最后，分析UA對(duì)Wnt/β-cantenin信號(hào)的影響，并運(yùn)用TGF-β3過(guò)表達(dá)重組腺病毒及TGF-β3抑制劑，分析UA抑制結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116增殖與TGF-β3和Wnt/

3、β-cantenin信號(hào)的關(guān)系。結(jié)果表明，UA能明顯抑制HCT116細(xì)胞增殖，并能誘導(dǎo)G1期阻滯，同時(shí)促進(jìn)HCT116細(xì)胞凋亡。UA降低HCT116細(xì)胞中TGF-β3及p-Smad2/3的水平。TGF-β3抑制劑能增強(qiáng)UA對(duì)HCT116細(xì)胞增殖抑制作用，而外源性過(guò)表達(dá)TGF-β3能減弱UA對(duì)HCT116細(xì)胞增殖的抑制作用。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，UA在 HCT116細(xì)胞中下調(diào)β-catenin水平并抑制Wnt/β-catenin信號(hào)。外源性過(guò)表