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文檔簡介
1、膠原由于其優(yōu)越的生物相容性,被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。本文選擇用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的類人膠原蛋白高分子材料,是由人類膠原基因的mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,重組入大腸桿菌經(jīng)高密度發(fā)酵而成,消除了動物源膠原病毒隱患的制約,特別是具備了大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的特點(diǎn),在生物醫(yī)用材料特別是組織工程支架材料的開發(fā)中具有極高的應(yīng)用價值和市場前景。同時目前重組膠原蛋白的生物合成及應(yīng)用潛質(zhì)已做了大量研究,但其生物學(xué)特性的研究還為數(shù)不多。 本文主要運(yùn)用體外
2、、體內(nèi)兩種方法探討了類人膠原蛋白的生物相容性。 1.體外細(xì)胞學(xué)試驗(yàn) 首先應(yīng)用MTT法比較了HLCⅠ、HLCⅡ?qū)HK細(xì)胞的粘附和增殖的影響。結(jié)果表明:BHK-21細(xì)胞在不同濃度的HLCⅠ、HLCⅡ組的細(xì)胞粘附數(shù)均遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于對照組,均具有顯著性差異(P<0.01)。BHK-21細(xì)胞在不同濃度的HLCⅠ、HLCⅡ組中生長旺盛且持續(xù)增殖。 近一步應(yīng)用MTT法比較了HLCⅡ與殼聚糖、透明質(zhì)酸及其它們復(fù)合對BHK細(xì)胞粘
3、附和增殖的影響。結(jié)果表明:HLCⅡ、殼聚糖、透明質(zhì)酸與共混組的細(xì)胞粘附數(shù)均多于對照組。與對照組相比,HLCⅡ組、殼聚糖組、HLCⅡ/殼聚糖組具有顯著性差異(P<0.01)。在1-5d,添加生物材料組的BHK-21細(xì)胞增殖均大于對照組。其中HLCⅡ?qū)HK-21細(xì)胞的CPR(%)值大于殼聚糖和透明質(zhì)酸組;生物材料復(fù)合組細(xì)胞的CPR(%)值又大于單一材料使用組。 2.體內(nèi)植入實(shí)驗(yàn) 首先對UV法、GA法和DHT法制備類人膠
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