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1、豚鼠氣單胞菌(Aeromonas caviae)CB101能產(chǎn)生多種分子量不同的幾丁質(zhì)酶.根據(jù)已知幾丁質(zhì)酶基因的DNA保守序列,利用人工合成的PCR引物和CB101總DNA,擴(kuò)增出一個(gè)約2.6kb的片段并克隆到pBluescript Ⅱ KS載體上.序列分析表明,這是目前已克隆的最大的微生物幾丁質(zhì)酶基因之一,命名為Chi 1,編碼865個(gè)氨基酸,蛋白質(zhì)分子量為91.5kDa,從N端到C端依次包括N-末端信號(hào)肽序列,類PKD(Polycy
2、stickidney disease,多囊腎)結(jié)構(gòu)域,催化結(jié)構(gòu)域,C端類REJ(Receptor for Egg Jelly,卵膠膜受體)區(qū)域和兩個(gè)幾丁結(jié)合區(qū),是目前已知的最大的微生物幾丁質(zhì)酶中的一個(gè).該酶降解膠體幾丁質(zhì)成幾丁二糖、三糖和N-乙酰葡萄糖胺,具有幾丁質(zhì)外切和內(nèi)切雙重功能.其N端563個(gè)氨基酸序列(Chi 1<'->,包括信號(hào)肽、PKD結(jié)構(gòu)域和催化區(qū))與粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens)Chi A高度相似
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