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1、水稻是世界上大約一半人口的主要糧食資源。重金屬污染和高溫脅迫是影響水稻產(chǎn)量的主要因素,所以利用基因工程手段,改善水稻抗重金屬和高溫脅迫的能力,對(duì)提高水稻產(chǎn)量具有重要意義。 本實(shí)驗(yàn)以水稻中花11號(hào)及其轉(zhuǎn)GST(谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶)+CAT1(過(guò)氧化氫酶)基因水稻為實(shí)驗(yàn)材料,用單一鎘(Cd)和鎘+高溫(38℃)處理生長(zhǎng)6周的水稻苗0-3天,測(cè)定各項(xiàng)生理生化指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著脅迫處理時(shí)間的延長(zhǎng),鎘+高溫對(duì)水稻幼苗的毒害作用較單一鎘脅
2、迫加重,但是轉(zhuǎn)基因水稻的株高、根長(zhǎng)、根數(shù)量、相對(duì)含水量、葉綠素含量、可溶性糖、凈光合速率、根系活力、氣孔開(kāi)關(guān)比率都明顯高于非轉(zhuǎn)基因水稻,而丙二醛(MDA)的含量和H2O2的產(chǎn)生則低于非轉(zhuǎn)基因水稻。 在單一鎘脅迫下,轉(zhuǎn)基因水稻和非轉(zhuǎn)基因水稻的抗氧化系統(tǒng)尤其是抗壞血酸和谷胱甘肽循環(huán)系統(tǒng)在變化幅度和/或變化趨勢(shì)方面都有明顯的差異。與對(duì)照相比,在鎘脅迫處理2天后,轉(zhuǎn)基因水稻的CAT活性顯著提高,而非轉(zhuǎn)基因水稻的CAT活性則降低;MDAR
3、活性在轉(zhuǎn)基因水稻與非轉(zhuǎn)基因水稻中都比對(duì)照組有顯著的提高。在鎘離子脅迫處理3天后,轉(zhuǎn)基因水稻的DHAR和SOD活性明顯高于非轉(zhuǎn)基因水稻的。另外,雖然在鎘離子脅迫下,轉(zhuǎn)基因水稻和非轉(zhuǎn)基因水稻的APX和GR的活性及GSH的含量和抗壞血酸的氧還狀態(tài)的變化趨勢(shì)類(lèi)似,但是轉(zhuǎn)基因水稻的這些指標(biāo)都比非轉(zhuǎn)基因的高。 鎘+高溫復(fù)合脅迫比單一鎘脅迫對(duì)水稻的毒害作用加重,但是轉(zhuǎn)基因水稻比非轉(zhuǎn)基因水稻受害輕。鎘+高溫復(fù)合脅迫較單一鎘脅迫對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻抗氧化
4、系統(tǒng)尤其是抗壞血酸和谷胱甘肽循環(huán)系統(tǒng)的影響明顯不同。其中,一個(gè)顯著的區(qū)別就是在復(fù)合脅迫條件下,CAT和GR的活性顯著提高,而在單一鎘脅迫條件下它們的活性都降低。另一個(gè)顯著的特征是盡管轉(zhuǎn)基因水稻MDAR、SOD和GST的活性在復(fù)合脅迫條件下和單一鎘脅迫條件下的變化趨勢(shì)相似,但是復(fù)合脅迫條件下這些酶的活性都比單一鎘脅迫條件下的高。更重要的是在復(fù)合脅迫條件下轉(zhuǎn)基因水稻中抗壞血酸的氧還狀態(tài)比單一鎘脅迫條件下高,并且復(fù)合脅迫條件下轉(zhuǎn)基因水稻的CA
5、T、SOD、GR、GST、MDAR活性和抗壞血酸的氧還狀態(tài)都比非轉(zhuǎn)基因水稻的高。這些結(jié)果表明,復(fù)合脅迫是一個(gè)更為復(fù)雜的性狀,其毒害作用比單一鎘脅迫更大,但不等于兩種單一脅迫的疊加。這說(shuō)明復(fù)合脅迫與單一脅迫對(duì)植物抗氧化系統(tǒng)的影響有明顯的差別,但無(wú)論是單一鎘脅迫還是復(fù)合脅迫下,轉(zhuǎn)基因水稻抗氧化脅迫的能力都高于非轉(zhuǎn)基因水稻。 總體結(jié)果表明,GST+CAT1在水稻中的共同表達(dá)能夠在一定程度上提高轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)鎘和鎘+高溫毒害的抗性,為水稻
6、抗重金屬和高溫脅迫分子育種提供了理論基礎(chǔ)。 總之,實(shí)驗(yàn)證明,單一鎘和鎘+高溫脅迫對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻抗氧化系統(tǒng)特別是整個(gè)抗壞血酸和谷胱甘肽循環(huán)系統(tǒng)的影響比非轉(zhuǎn)基因水稻的顯著,這可能是由于CAT1和GST在轉(zhuǎn)基因水稻中的共同表達(dá)影響了信號(hào)分子如活性氧分子、谷胱甘肽和抗壞血酸氧還狀態(tài)的水平,從而引起在功能上與CAT1和GST相關(guān)組分的變化。因此,轉(zhuǎn)基因水稻對(duì)鎘和鎘+高溫脅迫氧化損傷作用的降低,可能不僅僅是CAT1和GST共同作用的結(jié)果,而且
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