H19 在多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其對細(xì)胞系增殖、侵襲的影響.pdf

1、【研究目的】：
　　1.探討H19在多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）中的表達(dá)情況；
　　2.初步闡明H19在GBM中表達(dá)對細(xì)胞增殖、侵襲及凋亡的影響，為GBM的基因靶向治療提供循證學(xué)依據(jù)。
　　【研究方法】：
　　【1】實(shí)時熒光定量核酸擴(kuò)增（Polymerase chain reaction,qPCR)檢測H19在GBM和正常細(xì)胞的表達(dá)；
　　【2】CCK-8試劑

2、盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）檢測GBM U87細(xì)胞增殖；
　　【3】流式細(xì)胞技術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）檢測GBM U87細(xì)胞凋亡及GBM U87細(xì)胞S周期；
　　【4】侵襲小室( Transwell)檢測GBM U87細(xì)胞遷移和侵襲；
　　【5】蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)法檢測P53表達(dá)。
　　【6】選擇統(tǒng)計軟件包SPSS13.0對各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)做統(tǒng)計學(xué)的

3、分析。
　　【研究結(jié)果】：
　　【1】qPCR檢測H19在GBM和正常細(xì)胞表達(dá)顯示：H19在GBM較正常組織呈高表達(dá)。
　　【2】CCK-8檢測U87 GBM增殖：H19過表達(dá)的U87 GBM細(xì)胞增殖24h、48h較對照組細(xì)胞（U87-MG、U87-GFP）的增殖明顯增高。
　　【3】流式細(xì)胞技術(shù)檢測U87細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期：H19過表達(dá)降低GBM細(xì)胞凋亡率、增高S期細(xì)胞比例。
　　【4】侵襲小室檢測U87

4、細(xì)胞遷移及侵襲：H19過表達(dá)的U87GBM細(xì)胞的遷移增高、侵襲率增加。
　　【5】 Western blot法檢測P53表達(dá)：H19過表達(dá)的U87GBM細(xì)胞的P53的表達(dá)較對照組細(xì)胞明顯抑制。
　　【結(jié)論】：
　　【1】H19在GBM呈高表達(dá)。
　　【2】H19減少了GBM細(xì)胞凋亡率、增加GBM細(xì)胞遷移率、增加GBM細(xì)胞侵襲率、增加GBM細(xì)胞周期s期比例。
　　【3】H19抑制P53的表達(dá)。
　　【4