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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文利用多重?zé)晒釹SR標(biāo)記構(gòu)建甘藍(lán)型油菜品種的DNA指紋圖譜姓名:張清華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):作物生物技術(shù)指導(dǎo)教師:劉克德201106華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2011屆碩士學(xué)位論文AbstractTheconstructionofrapeseedDNAfingerprintingisofimportantapplicationvalueinrapeseedpurityandidentitytesting,varietyrigh
2、t’protection,varietyqualityinspectioninregionaltrial,andisofgreatsignificanceinheteroticgroupgermplasminnovationandvarietybreedingTheresearchbasedoncapillaryelectrophoresiswithfluorescentSSRmarkers,ahighthroughputdetecti
3、onsystemfittingforrapeseedvarietyidentificationwasestablishedfinallyThesystemwouldbeappliedinrapeseedvarietyidentificationandestablishingDNAfingerprintingofgreatscalerapeseedvarietyThisstudyistoestablishthetechnicalplatf
4、ormofrapeseedstandardDNAfingerprintthroughthekeytechnicofexperimentalscreeningofprimerpairs,basicprocessofestablishingcommonmultiplexPCRcombinationandfluorescentmultiplexPCRcombinationThemainresultsweresummarizedasfollow
5、s:(1)AccordingtohighdensityBrassicalinkagemapsandpreviousscreeningresultsfortheprimerinourlaboratory52pairsofSSRprimerswithhiglapolymorphismandamplificationqualitywereselectedinitiallyThe5’endofleftandrightprimerswerebot
6、hjointedwithM13FandM13Rrespectivelyand24ofthemCanbeselectedformultiplePCRcombinationbypolyacrylamidegelelectrophoresisAtthesametimerecordtherelativesizeoftheproducts(2)Icarriedoutresearchaboutthebasicprocessofestablishin
7、gmultiplexPCRusingselectedmultiplexPCRprimercombinationsTheupstreamuniversalprimerofM13Fwaslabeledwith6FAM,HEXrespectivelyAfullyformedmultiplexsystemfittingforPCRamplificationreactionanddetectionWasestablishedfinallythro
8、ughtheregulationofPCRcompositionandreactionconditionsTheamplifiedproductsweredetectedusingABI3500GeneticAnalyzerFurthermore,thegenotypeofeachsampleWaSdefinedaccordingtothelengthoftheamplificationproductsanalyzedbyGeneMap
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