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1、我國(guó)有眾多淤泥質(zhì)港口,需定期進(jìn)行清淤工作,給港口企業(yè)帶來(lái)了較大的經(jīng)濟(jì)壓力。適航水深技術(shù)的提出緩解了部分壓力,但仍存在因浮泥的沉降而適航厚度減小的問(wèn)題。有報(bào)道提出胞外聚合物可以延緩港口浮泥的沉降,提升適航水深技術(shù)的利用價(jià)值。胞外聚合物(Extracellular Polymeric Substances),是由微生物在一定環(huán)境下分泌的高分子質(zhì)量的聚合物,主要由多糖、蛋白質(zhì)等組成。在此基礎(chǔ)上,本文主要目標(biāo)是篩選高產(chǎn)胞外聚合物的菌株,對(duì)其延緩
2、浮泥沉降的性能進(jìn)行測(cè)定,了解所產(chǎn)胞外聚合物的性質(zhì),進(jìn)一步對(duì)胞外聚合物延緩浮泥沉降的機(jī)理進(jìn)行初步研究。
本研究以不同港口所取泥樣為原材料,經(jīng)篩選得到了16株產(chǎn)胞外聚合物的菌株,以zh-14號(hào)菌株產(chǎn)量最高。經(jīng)16S rDNA測(cè)序,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,鑒定為Burkholderia(伯克霍爾德菌)。進(jìn)一步對(duì)其產(chǎn)胞外聚合物培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化,單因素實(shí)驗(yàn)確定最優(yōu)碳源、氮源分別為蔗糖和NH4Cl;在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,以蔗糖、NH4Cl和MgSO4
3、為變量,采用Box-Behnken設(shè)計(jì)進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化,最終確定產(chǎn)胞外聚合物的最優(yōu)發(fā)酵條件組合為蔗糖21.0 g/L,NH4Cl1.1 g/L,MgSO40.2 g/L,KH2PO41.0 g/L,Na2HPO4·12H2O2.0 g/L,CaCO31.5 g/L,變量間兩兩交互作用不明顯。
胞外聚合物組成的測(cè)定結(jié)果表明其主要由多糖組成,含量約47%。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)利用DEAE離子交換樹脂純化后的多糖特性粘度為800.6 mL/g;進(jìn)
4、一步采用HPLC測(cè)定了其單糖組成,結(jié)果顯示主要單糖組成為甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和巖藻糖,比例為0.06∶0.19∶1.00∶0.09∶0.48,此外還含有少量半乳糖醛酸。
最后,測(cè)定了不同胞外聚合物濃度下浮泥沉降性能,結(jié)果顯示隨EPS濃度增大浮泥沉降速度變緩,當(dāng)EPS達(dá)到0.8 g/L時(shí),實(shí)驗(yàn)期間內(nèi)未檢測(cè)到浮泥的沉降。通過(guò)表面電荷、粒徑及粘度的變化,推測(cè)胞外聚合物延緩浮泥沉降機(jī)理可能為:胞外聚合物與帶負(fù)電浮泥顆粒作
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