瘤胃纖維分解菌KB對奶牛瘤胃發(fā)酵及生產(chǎn)性能的影響.pdf

1、本文旨在研究奶牛瘤胃中玉米秸稈分解菌的篩選、鑒定，及其對奶牛瘤胃發(fā)酵和生產(chǎn)性能的影響，分為4個試驗完成。
　　 試驗一目標菌株的篩選及產(chǎn)酶條件的優(yōu)化。為了從瘤胃中篩選出對玉米秸稈有高效分解作用的目的菌株，并優(yōu)化其產(chǎn)酶條件，本試驗首先以玉米秸稈為粗飼料飼喂4頭安裝有永久瘤胃瘺管的荷斯坦奶牛20 d，促進瘤胃中且標菌群的生長。然后取4頭奶牛的瘤胃液混合，進行富集培養(yǎng)，使目標菌迅速擴繁。其次采用剛果紅平板法對產(chǎn)纖維素酶的菌株進行初篩，

2、選取透明圈大的菌株進行玉米秸稈搖瓶復篩，得到一株對玉米秸稈有高效分解作用的目標菌株。通過對目標菌的產(chǎn)酶條件的優(yōu)化，得到在38.5℃條件下，該菌株的最適產(chǎn)酶條件為接種量為8％、氮源為NH3NO3、吐溫80含量為1％。
　　 試驗二目標菌株的鑒定。為了確定試驗一中所得目標菌的菌屬，本試驗采用PCR分子鑒定法對目標菌進行16rRNA基因序列檢測，得知目標菌共有1500個堿基片段，編碼500個氨基酸，AT/CG=687/813。BLAS

3、T同源性比對結果顯示目標菌株為產(chǎn)堿菌科，與Kerstersia菌屬的相似度為99％，與Bordetella菌屬的相似度為96％，本次命名為KB菌。
　　 試驗三KB菌對奶牛瘤胃發(fā)酵的影響。本試驗旨在研究KB菌對奶牛瘤胃發(fā)酵的影響，選用3頭體況良好，體重、日產(chǎn)奶量均相近，安裝有永久性瘤胃瘺管的健康泌乳中期荷斯坦奶牛，試驗分3組，飼喂3種不同處理的日糧，即0 cfu/d（對照組）、0.7×1011 cfu/d(試驗組1)和1.4×1

4、011 cfu/d（試驗組2）。采用3×3拉丁方試驗設計，試驗分為3期，每期預試期15d，正試期3d。飼喂KB菌后，測定瘤胃內(nèi)環(huán)境指標（pH值、原蟲數(shù)量、細菌總數(shù)、氨態(tài)氮濃度、揮發(fā)性脂肪酸濃度、菌體蛋白濃度）。結果顯示，試驗組瘤胃液pH值（試驗組1:6.49;試驗組2:6.56）、氨態(tài)氮（試驗組1:14.11;試驗組2:14.64）、揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度(試驗組2:101.76)、乙酸濃度(試驗組1:67.38;試驗組2:68.3

5、1)與對照組(pH值:6.43、氨態(tài)氮:12.89、VFA濃度:96.7、乙酸濃度:64.42）相比均顯著提高（P＜0.05），而瘤胃原蟲數(shù)，丙酸，丁酸和乙/丙酸比例與對照組相比無顯著差異（P＞0.05）。
　　 試驗四KB菌對奶牛生產(chǎn)性能的影響。本試驗旨在研究KB菌對奶牛生產(chǎn)性能的影響，選用18頭體況良好，胎次相同，體重、日產(chǎn)奶相近的泌乳中期荷斯坦奶牛，隨機分為3個處理組，每個處理6頭奶牛，每頭奶牛為1個重復。飼喂3種不同處理

6、的日糧，即0 cfu/（對照組）、0.7×1011cfu/d（試驗組1）和1.4×1011cfu/d（試驗組2），試驗預試期10 d，正試期40 d。測定產(chǎn)奶量及乳成分。飼喂KB菌40 d后，4％標準乳產(chǎn)量與對照組(19.18kg/d)相比，試驗組1(19.27kg/d)、試驗組2(21.34kg/d)顯著(P＜0.05)提高。試驗組2的乳蛋白率(3.54％)、乳脂率(3.72％)差異顯著（P＜0.05），各處理乳糖率、非脂乳固體物差異