中國荷斯坦牛GHR多態(tài)性檢測技術(shù)建立及與產(chǎn)奶性狀關(guān)聯(lián)分析.pdf

1、生長激素受體(GHR)是泌乳刺激素和生長激素受體超家族成員之一，是具有620個(gè)氨基酸殘基的跨膜糖蛋白，其胞外區(qū)能與生長激素(GH)結(jié)合并通過胞質(zhì)區(qū)進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。GHR基因的突變可能導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)及功能的改變，進(jìn)而影響到信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及GH作用的生理效應(yīng)。 Blott等(2003)對(duì)荷斯坦牛和娟姍牛的研究首次發(fā)現(xiàn)GHR基因cDNA序列第836位的單核苷酸突變T/A，導(dǎo)致其密碼子由TTT突變?yōu)門AT,從而使GHR跨膜區(qū)第279位的苯丙氨酸突

2、變?yōu)槔野彼?F279Y)。通過連鎖不平衡作圖和單倍型分析表明：該突變位點(diǎn)可以解釋奶牛20號(hào)染色體上影響產(chǎn)奶性狀QTL的部分效應(yīng)，其與產(chǎn)奶量的增加、乳脂率和乳蛋白率的下降以及屠體重的減少有顯著關(guān)聯(lián)。 本研究采用引入酶切位點(diǎn)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PIRA-PCR)和限制性片段長度多態(tài)(RFLP)方法構(gòu)建了GHR基因F279Y多態(tài)位點(diǎn)的檢測平臺(tái)，并進(jìn)一步研究該位點(diǎn)與中國荷斯坦牛產(chǎn)奶性狀之間的關(guān)聯(lián)度。 通過對(duì)1145頭中國荷斯坦牛GH

3、R基因F279Y位點(diǎn)進(jìn)行多態(tài)性檢測，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：TT、AT和AA的基因型頻率分別為0.384、0.509和0.107，等位基因T和A的頻率分別為0.639和0.361。采用動(dòng)物模型對(duì)GHR基因F279Y位點(diǎn)的多態(tài)性與305天產(chǎn)奶量、乳脂量、乳脂率、乳蛋白量和乳蛋白率等5個(gè)產(chǎn)奶性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果表明：對(duì)于第一泌乳期數(shù)據(jù)，該位點(diǎn)與305天產(chǎn)奶量(P<0.01)、乳脂率(P<0.05)和乳蛋白率(P<0.01)關(guān)聯(lián)顯著：而與乳脂量和乳蛋

4、白量關(guān)聯(lián)不顯著(P>0.05)。Bonferronit檢驗(yàn)多重比較結(jié)果表明：對(duì)于產(chǎn)奶量和乳脂率，TT與AT基因型之間差異顯著(P<0.05)：對(duì)于乳蛋白率，TT與AT基因型之間差異顯著(P<0.01)，TT與AA基因型之間差異亦顯著(P<0.05)。乳蛋白率的加性效應(yīng)為-0.0258％(P<0.01)，305天產(chǎn)奶量和乳蛋白量的顯性效應(yīng)分別為214.005kg(P<0.01)和5.515kg(P<0.05)，乳脂率和乳蛋白率的替代效應(yīng)分

5、別為-0.0475％(P<0.05)和-0.0306％(P<0.01)。其中，T等位基因是提高乳成份的優(yōu)勢等位基因，A等位基因是提高產(chǎn)奶量的優(yōu)勢等位基因。 綜上所述，本研究建立了快速有效的GHR基因F279Y位點(diǎn)多態(tài)性的分子檢測方法，并在中國荷斯坦牛群體中驗(yàn)證了該突變位點(diǎn)的不同基因型對(duì)產(chǎn)奶性狀具有顯著效應(yīng)。因此該位點(diǎn)可以作為一個(gè)可靠的分子遺傳標(biāo)記，應(yīng)用到我國荷斯坦牛分子育種中，通過對(duì)產(chǎn)奶性狀進(jìn)行標(biāo)記輔助選擇，提高選擇準(zhǔn)確性和效率