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1、目的:建立大氣細(xì)顆粒物(fine particulate matter, PM2.5)長(zhǎng)期慢性暴露的大鼠模型,探討了PM2.5長(zhǎng)期慢性暴露對(duì)大鼠肺臟的影響及其機(jī)制,為防治PM2.5長(zhǎng)期慢性暴露對(duì)機(jī)體的影響提供理論基礎(chǔ)。
方法:SD大鼠32只,隨機(jī)分成2組:細(xì)顆粒物暴露組(PM組)、空氣凈化器組(FA組),每組均為16只。分別于3個(gè)月、6個(gè)月時(shí)各組處死8只大鼠。應(yīng)用光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)大鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar l
2、avage fluid, BALF)白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞數(shù)量,HE染色觀察大鼠肺組織形態(tài)學(xué)改變,免疫組化方法檢測(cè)CD3、CD68陽性細(xì)胞表達(dá)。硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)法檢測(cè)大鼠肺組織中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量、黃嘌呤氧化酶法測(cè)定錳超氧化物歧化酶( Mn-superoxide dismutase, MnSOD)活力,免疫組化方法檢測(cè)大鼠肺組織中血紅素氧化合酶(heme o
3、xygenase1, HO-1)蛋白表達(dá)。
結(jié)果:⑴各組大鼠暴露的PM2.5濃度的比較:2015年2月1日至4月30日3個(gè)月期間及2015年2月1日至7月31日6個(gè)月期間,室外PM2.5濃度及PM組PM2.5濃度均明顯高于FA組(P<0.05),室外PM2.5濃度與PM組PM2.5濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。⑵各組大鼠的肺組織病理學(xué)(HE染色)及炎癥評(píng)分的比較:肺組織病理炎癥評(píng)分結(jié)果示,PM組較FA組病理評(píng)分明顯增高
4、(P<0.05),PM6月組較PM3月組評(píng)分明顯增高(P<0.05),6月FA組與3月FA組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。HE染色可見PM組肺臟炎癥明顯,PM6月組炎癥重于PM3月組。⑶各組大鼠的BALF白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞百分比的比較:與FA組比較,PM組3月及6月BALF中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比均明顯增高(P<0.05);6月PM組較3月PM組顯著升高(P<0.05)。6月FA組與3月FA組比較差異無
5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。⑷各組大鼠的肺組織CD3表達(dá)的比較:PM組CD3陽性的Area、IOD、IDO/Sum Area較FA組明顯增高(P<0.05),PM6月組較3月組CD3陽性的Area、IOD、IDO/Sum Area明顯升高(P<0.05),6月FA組與3月FA組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。⑸各組大鼠的肺組織CD68表達(dá)的比較:PM組CD68陽性的Area、IOD、IDO/Sum Area較FA組均明顯增高(P<
6、0.05),PM6月組較3月組CD68陽性的Area、IOD、IDO/Sum Area明顯升高(P<0.05),6月FA組與3月FA組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。⑹各組大鼠的肺組織MDA含量比較:PM組MDA含量較FA組顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),PM6月組MDA含量較PM3月組顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。6月FA組與3月FA組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。⑺各組大鼠的肺組織MnSOD活
7、力比較:PM組MnSOD活力較FA組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),PM6月組MnSOD活力較3月組顯著減低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),6月FA組與3月FA組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。⑻各組大鼠的肺組織HO-1表達(dá)的比較:PM組HO-1 Area、IOD、IDO/Sum Area較FA組均明顯增高,PM3月組較6月組Area、IOD、IDO/Sum Area明顯升高,其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),
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