低溫下寒地冬小麥部分冷相關(guān)基因和脂肪酸代謝關(guān)鍵酶基因定量分析.pdf

1、在高寒地區(qū)進(jìn)行冬小麥抗寒研究，受到生育期和氣候條件不穩(wěn)定的限制，在大田種植試驗(yàn)材料有很強(qiáng)的隨機(jī)性，試驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性差。而冬小麥抗寒分子水平上的研究需求迫切，已經(jīng)成為育種實(shí)踐工作中的瓶頸。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬冷誘導(dǎo)條件進(jìn)行試驗(yàn)具有操作性強(qiáng)重復(fù)性好，試驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可控的特點(diǎn)。冬小麥在低溫誘導(dǎo)下產(chǎn)生很多分子水平和生化水平的代謝變化，表現(xiàn)為:冷信號(hào)的傳遞和冷脅迫及冷相關(guān)基因的表達(dá)與調(diào)控，抗凍蛋白的產(chǎn)生和富集，滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的積累和膜脂成分的變化。本研究使用抗

2、寒品種東農(nóng)冬麥1號(hào)和不抗寒品種濟(jì)麥22作為材料，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用光溫培養(yǎng)箱和低溫冰箱模擬地表溫度，設(shè)定一系列溫度處理對(duì)試驗(yàn)材料進(jìn)行冷馴化和冷凍處理。在冷馴化初期和冷凍初期取得試驗(yàn)材料的分蘗節(jié)，進(jìn)行熒光定量PCR和氣相色譜分析，以分析不同處理下基因的具體表達(dá)情況和冷凍后細(xì)胞膜脂組分的變化。獲得如下研究成果:
　　 1.實(shí)驗(yàn)室模擬低溫條件，4-10℃冷馴化24d后進(jìn)行冷凍實(shí)驗(yàn)，分蘗節(jié)移栽的成活率差異，可以鑒定冬小麥的抗寒性。
　

3、　 2.東農(nóng)冬麥1號(hào)冷馴化12h和冷凍后6h Wrab17基因上調(diào)表達(dá)約14.7和20倍，冷馴化2h和冷凍8hWcs120基因上調(diào)表達(dá)約12.8倍和2.1倍，冷凍6h，Wcor80基因上調(diào)6.7倍。與濟(jì)麥22相比東農(nóng)冬麥1號(hào)中三個(gè)基因的響應(yīng)時(shí)間短，表達(dá)豐度高。在冷馴化階段最敏感的差異表達(dá)基因是Wcs120。冷凍階段最敏感的差異表達(dá)基因是Wrab17。
　　 3.Unigene3150-B2，nlUGTa-S17890079和g