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文檔簡介
1、近年來,食品和飼料中違法添加三聚氰胺的問題屢禁不止,嚴(yán)重威脅著人類及寵物的生命健康和安全。因此,本論文基于免疫抑制分析的方法,建立了一種快速、靈敏、穩(wěn)定的表面等離子體共振傳感器的方法,用以檢測奶制品和寵物食品中三聚氰胺含量。
實(shí)驗(yàn)利用芯片表面的三聚氰胺包被原與抗體的結(jié)合反應(yīng),觀察響應(yīng)值的變化,實(shí)現(xiàn)三聚氰胺的檢測。在適宜的條件下,選取pH4.5的醋酸鹽緩沖液作為偶聯(lián)緩沖液修飾芯片;以0.1 mol L-1的HC1溶液作為再生液,
2、SPR芯片重復(fù)使用近500次,且響應(yīng)值變化范圍低于5%;在5μg mL-1的抗體濃度下,測定不同濃度的三聚氰胺樣品表現(xiàn)出了良好的線性關(guān)系,在1.4×10-3-0.17μg mL-1的濃度范圍內(nèi),其檢測靈敏度(IC50)和檢測限(IC15)分別是2.32×10-2μg mL-1和1.4×10-3μg mL-1。在三聚氰胺類似物交叉實(shí)驗(yàn)中,三聚氰酸、三聚氯氰、阿特拉津的交叉率皆小于0.1%,說明SPR免疫傳感具有很高的特異性。對全脂牛奶、脫
3、脂奶粉、嬰幼兒奶粉、狗糧、貓糧五種樣品進(jìn)行三聚氰胺的添加回收實(shí)驗(yàn),回收率分別為76.4%-105.0%;97.9%-99.9%;79.0-113.5%;86.0%-113.3%;73.5%-109.4%,其相應(yīng)的檢測靈敏度(IC50)分別是2.57×10-2μg mL-1、2.32×10-2、2.51×10-2、2.66×10-2、2.68×10-2μg g-1,遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國際標(biāo)準(zhǔn)中三聚氰胺的最大殘留限量。
利用本文方法,在15
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