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文檔簡介
1、目的:觀察降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)對血管緊張素 II(AngII)誘導(dǎo)血管平滑肌細胞(VSMCs)增殖過程中能量代謝的影響及其機制,探索該作用與細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)和AMP激活的蛋白激酶(AMPK)相關(guān)的信號通路。
方法:組織貼塊法體外培養(yǎng)SD大鼠胸主動脈VSMCs,取第3-10代用于實驗。分別用CGRP或/和AngII處理細胞。噻唑藍比色法(MTT)及細胞計數(shù)法觀察CGRP對AngII誘導(dǎo)大鼠VSMCs增殖
2、的影響;Janus Green B染色觀察細胞線粒體數(shù)目及形態(tài);ATP測試試劑盒檢測細胞內(nèi)ATP含量。油紅O染色檢測細胞內(nèi)脂質(zhì)含量;Western blot檢測細胞p-AMPK、p-ERK1/2的表達。
結(jié)果:CGRP預(yù)處理能降低AngII誘導(dǎo)的大鼠VSMCs的生存率(p﹤0.05),同時拮抗AngII引起細胞內(nèi)線粒體增多、ATP水平升高、脂質(zhì)聚集的作用,在此過程中伴隨細胞內(nèi)p-AMPK、p-ERK1/2表達下調(diào)(p﹤0.05
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