siRNA抑制EGFR對(duì)乳腺癌細(xì)胞放射敏感性的影響.pdf

1、目的: 采用干擾 RNA技術(shù)(small interfering RNA，siRNA)抑制SKBR-3，HER-2(+++)，EGFR(+++)乳腺癌細(xì)胞EGFR的表達(dá)，研究 EGFR對(duì)HER-2過(guò)表達(dá)細(xì)胞對(duì)X線敏感性的變化。
　　 方法: 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染及鑒定：將細(xì)胞隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白組，重組質(zhì)粒 EGFR-siRNA和 Neg-siRNA分別被轉(zhuǎn)染入實(shí)驗(yàn)組及陰性對(duì)照組;Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞EGFR的表

2、達(dá)水平；檢測(cè)放療后放射生物學(xué)指標(biāo)：6MV射線照射4Gy后0，24h，48h收集細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率；克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞D0,SF2和α等值。
　　 結(jié)果: 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SKBR-3細(xì)胞，Western分析表明轉(zhuǎn)染EGFR-siRNA的陽(yáng)性細(xì)胞株在蛋白質(zhì)水平受到明顯抑制；X線照射24h及48h后，EGFR表達(dá)受抑制細(xì)胞凋亡率均高于轉(zhuǎn)染陰性質(zhì)粒組和空白對(duì)照組(P分別為0.045及0.039)；EGFR受抑制的細(xì)胞D0值和SF