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1、大量資料表明苦蕎麥?zhǔn)俏覈?guó)寶貴的資源之一,本研究以苦蕎麥蛋白粉為原料提取苦蕎麥活性肽,對(duì)提取條件及影響因素進(jìn)行了優(yōu)化,確定了最佳提取條件;對(duì)其進(jìn)行分離純化;研究了苦蕎麥活性肽的氨基酸組成、分子量及清除O2-能力等相關(guān)理化性質(zhì);通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn),研究了苦蕎麥活性肽的抗氧化性和降血糖功能。試驗(yàn)結(jié)論如下: (1)最佳提取條件的確定:采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)方法,研究AS1.398中性蛋白酶和2709堿性蛋白酶水解苦蕎麥蛋白粉提取苦蕎麥活性肽
2、的最佳酶解工藝。試驗(yàn)結(jié)果表明:2709堿性蛋白酶提取苦蕎麥活性肽優(yōu)于AS1.398中性蛋白酶;2709堿性蛋白酶提取苦蕎麥活性肽的最佳提取條件為:溫度45℃、pH11、酶量60U/g、時(shí)間14h,極差值分析反映出影響苦蕎麥活性肽蛋白質(zhì)提取率的各因素的排列順序?yàn)椋幻噶浚緶囟龋緋H>時(shí)間,在此條件下蛋白質(zhì)提取率可達(dá)74.5%。 (2)苦蕎麥活性肽的理化性質(zhì)研究:以SephadexG-25柱層析純化苦蕎麥活性肽,毛細(xì)管電泳確定其純化效
3、果,采用氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)光還原法研究其抗氧化作用,高效液相凝膠色譜(HPLC)確定分子量,氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定其氨基酸組成。結(jié)果表明:苦蕎麥活性肽經(jīng)SephadexG-25層析后能得到粗分離;苦蕎麥活性肽對(duì)超氧陰離子自由基有很強(qiáng)的清除作用,清除率達(dá)到37.12%;苦蕎麥活性肽的相對(duì)分子量集中在100-1000Da;氨基酸組成分析表明,苦蕎麥活性肽由17種氨基酸組成,含有7種人體必需氨基酸(Val、Ile、Leu、Phe、Met
4、、Thr、Lys),占苦蕎麥活性肽氨基酸總含量的31.11%,因此,苦蕎麥活性肽具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和較強(qiáng)的保健功能。 (3)苦蕎麥活性肽的動(dòng)物試驗(yàn)表明:采用兩種體外動(dòng)物試驗(yàn)?zāi)P脱芯苛丝嗍w麥活性肽的抗氧化作用和降血糖功能。用給大鼠注射四氧嘧啶人為引起其血糖升高后,預(yù)先給予苦蕎麥活性肽的大鼠,其血糖升高值明顯低于未給予苦蕎麥活性肽的對(duì)照組,其中給予高濃度苦蕎麥活性肽組大鼠血糖降低幅度最大,可達(dá)17.59%;從而說(shuō)明,預(yù)防性給予苦蕎麥
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