浙江省非綜合征型聾病分子流行病學(xué)調(diào)查.pdf

1、聽力下降是一種非常常見的先天性疾病，在大約每1000個新生兒中就有一個有聽力異常。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)估計，2005年全球聽力殘疾人數(shù)為2.78億，中國有聽力語言障礙的殘疾人約2780萬，并以每年新生3萬聾兒的速度增長。耳聾是由遺傳和環(huán)境因素引起的，其中50％的耳聾患者是由遺傳因素造成的。由遺傳因素引起的耳聾包括綜合征型耳聾(占30％)和非綜合征型耳聾(占70％)。非綜合征型耳聾可以根據(jù)不同的遺傳方式進(jìn)一步分為：常染色體隱性遺傳、常

2、染色體顯性遺傳、X-連鎖遺傳和母系遺傳。據(jù)統(tǒng)計，超過30％的患者是由于使用氨基糖甙類抗生素，如鏈霉素、慶大霉素而致聾的。特別需要指出的是，在氨基糖甙類藥物性耳聾患病人群中，部分患者由于過量用藥致聾，而部分患者對氨基糖甙類藥物有超敏性。研究表明，線粒體12SrRNA基因是與氨基糖甙類抗生素導(dǎo)致的非綜合征型聽力損失的一個突變熱點(diǎn)區(qū)域。在這些突變位點(diǎn)中，位于12SrRNA高度保守的解碼區(qū)的同質(zhì)性的A1555G和C1494T突變與耳聾相關(guān)。這兩

3、個突變導(dǎo)致很多患者的氨基糖甙類藥物性耳聾。因此對線粒體12SrRNA基因突變引起的耳聾進(jìn)行研究，不僅是人類認(rèn)識自然和改造自然的一個重要方面，而且還具有重大的社會和經(jīng)濟(jì)意義。 在本研究中，我們首先成功地建立了遺傳資源的收集網(wǎng)絡(luò)，應(yīng)用這個網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)收集大量非綜合征型耳聾患者資料，開展線粒體12SrRNA基因分子流行病學(xué)工作，明確浙江省大部分地區(qū)線粒體12SrRNA基因的突變發(fā)生頻率，探討mtDNA突變致聾的分子機(jī)制。此外，繪制浙江省線

4、粒體12SrRNA基因突變頻譜，為完善耳聾基因診斷的程序和方法提供依據(jù)。為本研究包括如下兩部分： 第一部分：遺傳性耳聾患者臨床資料的收集和線粒體12SrRNA基因突變的流行病學(xué)調(diào)查 本部分的研究目的是建立一個含有DNA樣品、永生細(xì)胞系、臨床資料和家系資料的遺傳資源庫，開展線粒體12SrRNA基因突變的分子流行病學(xué)研究工作，繪制浙江省線粒體12SrRNA基因突變頻譜。在本研究中，我們首先建立了遺傳性耳聾的遺傳資源的收集網(wǎng)絡(luò)

5、，通過網(wǎng)絡(luò)獲得信息；根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)采集臨床資料、DNA樣品并對部分家系建立了永生細(xì)胞系。經(jīng)過2003年10月-2008年3月，我們共收集到1642例雙側(cè)感音神經(jīng)性耳聾患者，其中1542例為來自全省10個地市聾啞學(xué)校的在校學(xué)生；100例來自門診散發(fā)的感音神經(jīng)性耳聾患者。隨后，我們對這些標(biāo)本進(jìn)行線粒體12SrRNA基因突變的篩查。通過研究檢測到68個突變位點(diǎn)，其中有28個突變位點(diǎn)未見報道；在致病突變中，最常見的為A1555G突變，共篩查出63

6、例，檢出率為3.96％，C1494T突變只發(fā)現(xiàn)3例，檢出率為0.18％。我們分析了線粒體12SrRNA基因各突變位點(diǎn)與耳聾表型之間的相關(guān)性；明確了浙江耳聾人群線粒體12SrRNA基因各突變位點(diǎn)的發(fā)生頻率；繪制了浙江省非綜合征型聾病人群線粒體12SrRNA基因的突變頻譜。此外，我們結(jié)合研究中篩查出的50例mtDNAA1555G突變個體，分析mtDNAA1555G突變在各個地區(qū)的發(fā)生頻率，探討藥物性耳聾的預(yù)防策略及意義。此研究結(jié)果為聾病的分

7、子診斷提供方法和依據(jù)，為我國建立聾病的產(chǎn)前基因診斷、遺傳篩查和遺傳咨詢提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)，為耳聾基因診斷在全國范圍開展提供流行病學(xué)數(shù)據(jù)。 第二部分：一個同時攜帶A1555G和G7444A突變耳聾家系的遺傳特點(diǎn)分析 線粒體12SrRNA和tRNASer(UCN)基因是導(dǎo)致非綜合征型聽力損失的兩個突變熱點(diǎn)區(qū)域。在本研究中，收集了1個母系遺傳感音神經(jīng)性聾家系，該家系同時攜帶A1555G和G7444A突變。臨床資料分析表明，該家系包括

8、藥物致聾的外顯率(藥物性聾患者/所有母系成員)為58％，而非藥物致聾的外顯率(非藥物性聾患者/所有母系成員)為25％，明顯高于其他攜帶A1555G突變的耳聾家系。先證者的線粒體全序列分析表明，該線粒體基因組共有28個多態(tài)位點(diǎn)，屬于東亞人群B4c1單體型。在這些多態(tài)位點(diǎn)中，除A1555G和G7444A突變外，未發(fā)現(xiàn)其它有功能意義的突變。這表明mtDNAG7444A突變可能加重由A1555G突變造成的線粒體功能缺失，從而增加耳聾的外顯率。