白芍總苷在急性CCI4肝損傷大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、白芍總苷(Total glucosides of paeony，TGP)廣泛的藥理研究發(fā)現(xiàn)，白芍總苷不僅有抗炎的作用，對(duì)急性化學(xué)性、免疫性肝損傷也有一定的防治作用。其機(jī)制與其抗自由基、提高抗氧化物酶的活性和免疫調(diào)節(jié)、抑制肝損傷大鼠體外的枯否細(xì)胞促肝星狀細(xì)胞增生等有關(guān)。
　　 本課題采用HPLC的方法，研究了白芍總苷在急性CCl4肝損傷大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和血漿蛋白結(jié)合率，并與正常大鼠進(jìn)行了比較，且比較了不同的藥物濃度對(duì)動(dòng)力學(xué)

2、參數(shù)和蛋白結(jié)合率的影響；采用大鼠在體胃腸吸收的方法，對(duì)不同濃度的白芍總苷在體胃腸吸收進(jìn)行了研究比較；利用血清指紋圖譜的方法初步推測(cè)了藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。具體研究?jī)?nèi)容如下：
　　 第一部分、白芍總苷在急性CCl4肝損傷大鼠體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)研究
　　 目的：研究白芍總苷在急性CCl4肝損傷大鼠體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)過程，考察藥物濃度對(duì)其動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響，并比較與正常大鼠的差異，為臨床合理用藥提供參考。
　　 方法：大鼠灌胃給予白芍總苷

3、，采用HPLC的方法，測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的血藥濃度。
　　 結(jié)果：白芍總苷給藥后，芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在模型組大鼠體內(nèi)，高、中、低劑量芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的t1/2分別為300.97、271.37、294.46min;313.34、302.33、302.76min。Ke(×10-3)分別為2.35、2.62、2.52mL/min;2.24、2.40、2.34mL/min。三個(gè)濃度芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的Cmax分別為22

4、.54、14.52、5.49μg/mL;9.02、5.04、2.34μg/mL。AUC0-t分別為8792.9、5048.3、1897.2μg·min/mL;3393.7、1930.6、809.0μg·min/mL。Tmax均為2h。在正常大鼠體內(nèi)，高、中、低劑量芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的t1/2分別為236.85、221.10、237.10min;224.12、238.77、227.71min。Ke(×10-3)分別為3.07、3.26、3

5、.28mL/min;3.13、2.92、3.12mL/min。三個(gè)濃度芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的Cmax分別為19.16、11.60、4.46μg/mL；7.16、4.00、1.93μg/mL。AUC0-t分別為6975.6、4064.1、1500.6μg·min/mL;2701.9、1635.4、635.1μg·min/mL。Tmax為2.5h。
　　 結(jié)論：模型組與正常組相比較，模型組的Cmax、AUC0-t顯著增大，t1/2延長(zhǎng)

6、，Tmax明顯縮短。模型組和正常組的Tmax和t1/2不受白芍總苷劑量影響，但Cmax和AUC0-t隨著劑量增大而增大成線性關(guān)系。
　　 第二部分、白芍總苷在急性CCl4肝損傷大鼠血漿中的蛋白結(jié)合率研究
　　 目的：體外研究芍總苷在急性CCl4肝損傷大鼠血漿中的蛋白結(jié)合率，并與正常大鼠血漿蛋白結(jié)合率進(jìn)行比較。
　　 方法：采用平衡透析法結(jié)合HPLC法，分別對(duì)白芍總苷中的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷與CCl4肝損傷大鼠血漿以

7、及正常大鼠血漿的蛋白結(jié)合率進(jìn)行測(cè)定。并采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理，進(jìn)行組內(nèi)高、中、低濃度及組間的比較。
　　 結(jié)果：白芍總苷血漿濃度在50、100和200μg/mL時(shí)，白芍總苷中的芍藥內(nèi)酯苷和芍藥苷在肝損傷大鼠血漿中的蛋白結(jié)合率分別為（12.4±1.5）％，（13.2±1.6）％，(20.2±2.1)％：（15.5±0.4）％，（16.5±1.4）％，(27.9±1.6)％。在正常大鼠血漿中的蛋白結(jié)合率分別為（8.1±0.

8、9）％，(9.7±2.3)％，（14.7±1.4）％；(12.7±1.6)％，(13.5±0.8)％，（15.6±0.2）％。
　　 結(jié)論：白芍總苷體外與肝損傷大鼠血漿中蛋白的結(jié)合屬低度結(jié)合，且與血漿濃度可能有一定的依賴性；同時(shí)模型組的血漿蛋白結(jié)合率高于正常組的血漿蛋白結(jié)合率。
　　 第三部分、白芍總苷的胃腸吸收動(dòng)力學(xué)研究
　　 目的：研究白芍總苷中芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在大鼠胃腸道中的吸收動(dòng)力學(xué)特征。
　　

9、 方法：采用在體大鼠胃腸吸收的實(shí)驗(yàn)方法及HPLC法，以芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷為考察指標(biāo)，檢測(cè)濃度的變化，計(jì)算不同濃度的白芍總苷在胃和小腸的吸收參數(shù)。
　　 結(jié)果：質(zhì)量濃度1、2、4mg/mL的白芍總苷受試液進(jìn)行2h的胃吸收實(shí)驗(yàn)，3種濃度的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷吸收量分別為(45.22±7.81)，(86.41±13.67),(153.77±12.38)μg/h;(18.04±2.89),(34.95±4.08),(61.36±9.11)

10、μg/h。芍藥苷質(zhì)量濃度為40、80、120mg/mL的白芍總苷腸循環(huán)液在小腸內(nèi)回流2h，低、中、高濃度的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在小腸的Ka值無顯著差異。白芍總苷以相同濃度在不同腸段回流2h，芍藥苷的Ka值在十二指腸與結(jié)腸、回腸有顯著差異，空腸與回腸、結(jié)腸有顯著差異；芍藥內(nèi)酯苷的Ka值在十二指腸、空腸與回腸、結(jié)腸有顯著差異。
　　 結(jié)論：白芍總苷在胃和腸內(nèi)均有吸收，但在十二指腸的吸收量最大。在胃和小腸內(nèi)的吸收量與藥物濃度成線性關(guān)系，

11、不同濃度的吸收速率常數(shù)無明顯差異，因此推測(cè)白芍總苷在體內(nèi)可能為被動(dòng)擴(kuò)散機(jī)制。
　　 第四部分、白芍總苷血清指紋圖譜的初步研究
　　 目的：研究白芍總苷在不同時(shí)間的血清色譜指紋圖譜，為研究其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：采用高效液相的方法，分析比較了空白血清，白芍總苷溶液和15min、1h、3h、6h的含藥血清，確定白芍總苷在血中的移行成分。
　　 結(jié)果：含藥血清中測(cè)得芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷，并隨著時(shí)間的

12、變化濃度表現(xiàn)出消長(zhǎng)變化，且在3小時(shí)峰面積最大。
　　 結(jié)論：獲得了白芍總苷不同時(shí)間點(diǎn)血清的HPLC色譜指紋圖譜，芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷入血移行，初步推測(cè)芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷可能是白芍總苷主要的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 綜上所述，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)急性CCl4肝損傷模型組的Cmax、AUC0-t較正常組顯著增大，t1/2延長(zhǎng)，Tmax明顯縮短。各組的Tmax和t1/2不受白芍總苷劑量影響，但Cmax和AUC0-t隨著劑量增大而增大成線性關(guān)