姜黃素對(duì)內(nèi)毒素性大鼠急性肺損傷中HO-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　建立內(nèi)毒素性 ALI大鼠模型,觀察兩種不同濃度姜黃素在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)內(nèi)毒素性大鼠急性肺損傷形態(tài)學(xué)、氧合、肺組織氧化應(yīng)激及血紅素氧合酶-1( HO-1)表達(dá)的影響。
　　方法:
　　分為5組,A組生理鹽水對(duì)照組(NS組),B組溶媒二甲基亞砜對(duì)照組(DMSO),C組脂多糖造模組(LPS),D組脂多糖造模組+姜黃素100mg/kg處理組(LPS+CUR100mg/kg),E組脂多糖造模組+姜黃素200mg/kg處理

2、組(LPS+CUR200mg/kg),每組按時(shí)相點(diǎn)又分為2h、6h及12h,90只大鼠完全隨機(jī)分配到各亞組,每組6只。根據(jù)分組分別于A組注射生理鹽,B組注射DMSO, C組注射LPS,D、E兩組注射LPS及姜黃素。觀察各組大鼠一般狀態(tài)變化,在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)抽血查動(dòng)脈血?dú)?并于2h、6h、12h分別放血處死大鼠,留取相應(yīng)的肺組織,觀察肺組織大體改變,行HE染色肺組織病理學(xué)檢查,光鏡下觀察并評(píng)分,對(duì)比觀察各組三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)的肺濕干重比(W/D)

3、、測(cè)定肺組織勻漿中髓過(guò)氧化物酶(MPO)的含量、免疫組化法檢測(cè)肺組織HO-1蛋白的表達(dá)并行半定量分析及RT-PCR方法檢測(cè)肺組織HO-1mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.PaO2和PaO2/FiO2的變化:B組與A組比較差別沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn) PaO2、PaO2/FiO2與 A組比較明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);D、E組PaO2、PaO2/FiO2在6h及12h時(shí)間點(diǎn)較

4、C組明顯上升,且以E組6h上升更明顯(P<0.05)。
　　2.肺組織濕干重比變化:B組大鼠W/D值與A組比較均無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)W/D值較A組明顯上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);D、E組W/D值在6h及12h較C組下降,且以E組6h組下降明顯,但仍高于A組(P<0.05)。
　　3.肺組織病理變化及其病理評(píng)分情況:大體觀察 A組各時(shí)間點(diǎn)大鼠肺臟正常,光學(xué)顯微鏡觀察

5、無(wú)明顯異常;B組肉眼及光學(xué)顯微鏡觀察情況大致同A組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);C組肺損傷嚴(yán)重,以12h為甚,C組各時(shí)間點(diǎn)病理評(píng)分均高于A組(P<0.05);D、E組肺損傷病理改變不同程度減輕,且D、E兩組在2h病理評(píng)分較C組無(wú)明顯下降(P>0.05),但在6h和12h的病理評(píng)分較C組明顯下降(P<0.05),且以E組6h下降更明顯(P<0.05)。
　　4.肺組織勻漿中MPO活性的變化:B組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺組織勻漿MPO活性

6、與A組比較未見(jiàn)明顯變化,兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)中肺組織MPO活性較A組增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);D、E組MPO活性在6h及12h較C組下降,且以E組6h組下降明顯,但仍高于A組(P<0.05)。
　　5.肺組織免疫組化觀察 HO-1蛋白表達(dá)的變化:B組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺組織HO-1蛋白陽(yáng)性免疫產(chǎn)物與A組比較未見(jiàn)明顯變化,兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組在相

7、應(yīng)時(shí)間點(diǎn)中肺組織HO-1蛋白表達(dá)較A組增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);D、E組HO-1蛋白表達(dá)在6h及12h較C組上升,且以E組6h組上升明顯(P<0.05)。
　　6.肺組織中HO-1mRNA的表達(dá)情況:B組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺組織HO-1mRNA表達(dá)與A組比較未見(jiàn)明顯變化,兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);C、D、E三組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)中肺組織HO-1mRNA表達(dá)較A組增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);D、E組HO-