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1、本文采用營(yíng)養(yǎng)液水培法測(cè)定了不同來(lái)源的快生、慢生大豆根瘤菌與我國(guó)主要的大豆核心種質(zhì)品種的共生結(jié)瘤固氮匹配組合,對(duì)在大豆品種綏農(nóng)20表現(xiàn)匹配性顯著差異的兩株慢生大豆根瘤菌USDA110-A和2178進(jìn)行了蛋白質(zhì)組學(xué)初步分析,以探尋其共生匹配性差異的原因。本研究將為根瘤菌劑選用和大豆種質(zhì)育種材料選擇提供依據(jù),實(shí)現(xiàn)共生體系高效共生固氮的目的。論文結(jié)果如下: 18株大豆根瘤菌和11個(gè)大豆品種進(jìn)行結(jié)瘤匹配試驗(yàn)結(jié)果表明,不同的大豆根瘤菌菌株間
2、結(jié)瘤固氮差異顯著,快生大豆根瘤菌表現(xiàn)出比慢生大豆根瘤更嚴(yán)格的品種匹配性;菌株USDA110、USDA110-A、113-2、HH103具有較為廣譜的共生結(jié)瘤特性;匹配性強(qiáng)的大豆品種有北京黑豆、商951099、鄭92116。匹配組合中發(fā)現(xiàn)在與品種綏農(nóng)20組合中,菌株USDA110-A與綏農(nóng)20共生結(jié)瘤良好,而2178卻不與該品種結(jié)瘤:這兩個(gè)組合是研究根瘤菌與其寄主共生結(jié)瘤的機(jī)理的理想材料。 菌株USDA110-A、2178經(jīng)綏農(nóng)2
3、0大豆苷元處理后,其蛋白質(zhì)組表達(dá)分析表明,USDA110-A有8個(gè)蛋白點(diǎn)發(fā)生上調(diào),7個(gè)蛋白點(diǎn)發(fā)生下調(diào);2178有5個(gè)蛋白點(diǎn)發(fā)生上調(diào),7個(gè)蛋白點(diǎn)發(fā)生下調(diào)。進(jìn)一步用MOLDI-TOF質(zhì)譜鑒定的差異表達(dá)蛋白,除了蛋白點(diǎn)USDA110-A的12號(hào)蛋白,2178的1、3、5、11、18號(hào)蛋白外,其它20個(gè)蛋白點(diǎn)得到成功的鑒定,基本確定了14個(gè)蛋白質(zhì)的功能,其余6個(gè)為未知功能的蛋白質(zhì)。 在本研究鑒定的USDA110-A表達(dá)的上調(diào)蛋白中,DH
4、DPS合成酶、磷酸化酶、糖基轉(zhuǎn)移酶等至少3個(gè)蛋白與共生結(jié)瘤相關(guān),并通過(guò)參與EPS的合成起作用;ABC類型的有機(jī)可溶物轉(zhuǎn)運(yùn)子(ABC-typeorganicsolventtransporter)是跨膜的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,它通過(guò)上調(diào)表達(dá)改變結(jié)瘤因子的結(jié)構(gòu),增加結(jié)瘤因子向胞外分泌,提高根瘤菌的親和匹配性。但在2178中未檢測(cè)到以上與EPS合成相關(guān)蛋白的差異表達(dá),也未檢測(cè)到其它與結(jié)瘤共生相關(guān)的蛋白。根瘤菌菌株對(duì)大豆苷元引起響應(yīng)的不同結(jié)果,是產(chǎn)生其與品種
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