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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:梗阻性黃疸(以下簡(jiǎn)稱梗黃),是由于各種原因造成膽汁無(wú)法通過(guò)正常途徑排泄入腸道,大量膽汁淤積于肝臟,同時(shí)破壞膽道結(jié)構(gòu),使膽汁逆流入血,從而對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重?fù)p害的癥侯群。梗黃時(shí)肝臟成為最先受損的器官,并最終導(dǎo)致心、腦、腎等重要器官功能不全及多器官功能衰竭(multiple organ failure,MOF)。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)結(jié)扎離斷大鼠膽總管,構(gòu)建梗黃大鼠模型,檢測(cè)PPARs、NF-kB和SOD在肝臟中的表達(dá),明確它們與梗黃時(shí)肝臟
2、損害的關(guān)系及意義,為進(jìn)一步闡明梗黃時(shí)肝臟損害的分子機(jī)制,尋找對(duì)抗該損害新的治療途徑奠定基礎(chǔ)。 方法:選取成年雄性SD大鼠120只,隨機(jī)分為四組:假手術(shù)(sham)7天組、膽道結(jié)扎(bile duct ligation,BDL)7天組、假手術(shù)19天組和膽道結(jié)扎19天組,每組30只。結(jié)扎并離斷膽總管構(gòu)建梗黃大鼠模型。各組大鼠分別于第7天和第19天處死,檢測(cè)血清中總膽紅素(total bilirubin,TB)、直接膽紅素(direc
3、t bilirubin,DB)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanineaminotransferase,ALT),肝臟組織行HE病理切片檢查明確黃疸及肝損傷情況。肝臟組織勻漿后應(yīng)用SOD測(cè)定試劑盒檢測(cè)肝臟組織中總SOD和CuZn-SOD活力。通過(guò)RT-PCR方法,以β-actin為內(nèi)參,檢測(cè)PPARs在肝臟中的mRNA水平。同時(shí)采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)PPARs及NF-kB在肝臟中的表達(dá)。 結(jié)論:梗黃大鼠肝臟中,PPARs在基因水平和蛋白水
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