大蒜多糖的提取純化及生物功能活性研究.pdf

1、大蒜是一種重要的藥食兩用植物資源，在我國種植面積很廣。大蒜的鱗莖即大蒜籽，含有多種營養(yǎng)物質(zhì)，具有多種藥理作用。大蒜多糖是其主要活性成分之一，具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒、降血糖等生理功能。本文以大蒜多糖為研究對象，系統(tǒng)研究了大蒜多糖的提取、分離純化、初級結(jié)構(gòu)，并對其抗氧化活性進(jìn)行了初步探索。主要研究內(nèi)容和結(jié)論如下： 本文研究了蒽酮-硫酸法測定大蒜多糖的含量。大蒜樣品用熱水提取，經(jīng)多級處理除去脂類、單糖、雙糖、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)制得大蒜

2、精制多糖，采用精制大蒜多糖測得大蒜多糖對葡萄糖的換算因子，建立蒽酮-硫酸法測定大蒜多糖含量的方法，并優(yōu)化了該方法的操作條件。優(yōu)化后的操作條件為：于冰水浴中加入蒽酮溶液，在沸水浴中加熱8min，自來水冷卻至室溫后在10min內(nèi)于585nm下讀取吸光度。在最優(yōu)操作條件下，蒽酮-硫酸法測定大蒜多糖含量的精密度試驗(yàn)RSD值為2.15％；平均加樣回收率為113％、RSD值為1.17％(n=3)。 以大蒜粉為原料，采用熱水浸提法提取大蒜多糖

3、。研究了粉碎度、提取溫度、提取次數(shù)、提取時間和固液比對大蒜多糖得率的影響，并以提取溫度，固液比及提取時間三個因素為考察因素，采用Lg(33)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了熱水浸提法提取大蒜多糖的工藝條件：即提取溫度80℃，固液比1:30(m/v)，提取時間150min。在上述提取條件下，大蒜多糖得率可達(dá)36.10％。 研究比較了serag法、三氯乙酸法、酶解sevag法聯(lián)用法三種方法脫除大蒜多糖提取液中的蛋白質(zhì)效果，結(jié)果表明：酶解sevag法聯(lián)

4、用法蛋白質(zhì)脫除率低于三氯乙酸法、高于sevag法，但其多糖損失率最小，綜合考慮，酶解sevag法聯(lián)用法是比較理想的脫除蛋白方法。 采用DEAE-52纖維柱層析分離純化大蒜多糖，得到組分GP-2與GP-3。將GP-2與GP-3分別上SephadexG-200柱，結(jié)果兩個組分都呈現(xiàn)單一洗脫峰，表明GP-2與GP-3純度較高。采用HPGPC法測得GP-2和GP-3的分子量分別為12379道爾頓(Da)、33865道爾頓(Da)。

5、 通過CrC分析，GP-2和GP-3為雜多糖，它們至少由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖五種單糖組成。紅外光譜分析結(jié)果顯示其具有典型的多糖特征吸收峰。 采用不同的體外抗氧化模型(抑制油脂氧化性模型、清除DPPH·自由基模型、清除超氧陰離子自由基(O-2·)模型、清除羥基自由基(OH·)模型)，分別研究了大蒜各組分多糖GP、GP-1、GP-2的抗氧化活性。結(jié)果表明，GP、GP-1、GP-2均具有一定的抗氧化活性。一定濃度范