紅花種質資源的SRAP分子鑒定及其與品質相關的分子標記研究.pdf

1、紅花(CarthamustinctoriusL.)是菊科(Compositae)紅花屬中唯一的栽培種。在我國，紅花的干燥管狀花，是傳統(tǒng)的活血化瘀中藥，具有活血通經，去瘀止痛之功效。 由于長期的自然選擇和人工選擇的結果，紅花種內產生了明顯的分化，形成了豐富的種質資源。不同紅花品種從外部的形態(tài)特征到內部的化學成分組成及含量上均呈現出很大的差異，這為紅花的品種選育提供了豐富的遺傳基礎，也為進一步開發(fā)紅花的利用價值提供了更多的選擇。單憑

2、表型性狀的差異進行選擇已不能滿足紅花育種工作的需要。本研究運用SRAP(sequence-relatedamplifiedpolymorphism，SRAP)標記對包括野生種在內的25個紅花品種的遺傳多樣性進行了分析，從分子水平對紅花種質資源進行了鑒定；同時篩選與紅花中藥用有效成分(羥基黃色素A)含量高低相關的分子標記，其主要結果如下： 一、利用優(yōu)化后的SRAP體系用30對引物對25個紅花品種的基因組DNA進行PCR擴增，多態(tài)性

3、好的9對引物共擴增出483條帶，其中多態(tài)性帶274條，平均每對引物可擴增出53條DNA片斷，30條多態(tài)性帶，占總位點的57％。聚類分析結果表明，在GS為0.29時，25個紅花品種被分成兩類，除13號野生種和4號栽培品種聚在一起外，野生種和其他栽培種完全分開。二者不僅在生物學性狀上相似，而且不同引物的擴增條帶中幾乎都出現相同的帶型，因此，我們推測4號品種可能來源于野生種綿毛紅花。GS值為0.43時，25個紅花品種被聚為六類，4號栽培品種和

4、13號野生種綿毛紅花聚在一起外，其它栽培種則分成五類。在栽培品種間整體遺傳相似系數較低，利用引物的不同組合，可明顯區(qū)分不同品種。 二、在此基礎上，對區(qū)別于栽培種和野生種的特異性條帶進行回收測序，四對引物共擴增出5條特異性條帶，即SPW237，SPW219，SPW371，SPW292，SPW206。其精確長度分別為：237bp、219bp、371bp和292bp、206bp。這些特異性條帶序列的獲得，為栽培種紅花(Carthamu

5、stinctoriusL.)與野生種綿毛紅花(CarthamuslanatusL.)的分子鑒別提供了有效途徑。 三、采用HPLC法，對紅花親本及雜交F2代植株的羥基黃色素A含量進行綜合分析，結果表明，F2代各植株含量呈連續(xù)性變異，紅花羥基黃色素A含量為主-多效基因控制的數量性狀。在此基礎上，采用BSA法建立了羥基黃色素A品質性狀的極端基因池，利用優(yōu)化后的紅花SRAP反應體系對基因池用182對引物反復篩選，得到與紅花品質相關的3條