KD血清對HUVEC中NF-κB信號通路的影響及PDTC的干預(yù).pdf

1、目的:
　　 1.研究川崎病(KD)血清對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)中核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κ B)信號通路的影響，探討該信號通路與KD發(fā)病機制之間的關(guān)系。
　　 2.觀察吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)對KD血清培養(yǎng)下HUVEC活力的干預(yù)作用，探討PDTC的作用機制和潛在的臨床應(yīng)用價值。
　　 方法:
　　 HUVEC隨機分4組:正常組(N)組，KD組（K組），IVIG組（G組），PDTC組（P組

2、）。N組:RPMI-1640培養(yǎng)液+正常兒童血清，K組:RPMI-1640培養(yǎng)液+KD兒童血清，G組:RPMI-1640培養(yǎng)液+KD兒童血清+IVIG，P組:RPMI-1640培養(yǎng)液+KD兒童血清+PDTC。各組培養(yǎng)24h后，觀察各組細(xì)胞形態(tài)，MTT比色法檢測細(xì)胞活力，RT-PCR法檢測細(xì)胞中NF-κB p65mRNA，Iκ BαmRNA，MMP-9 mRNA，ICAM-1mRNA的表達(dá)，Western-blotting法檢測NF-κ

3、B p65蛋白，IκBα蛋白的表達(dá)，最后SPSS17.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.K組HUVEC較N組增殖受限，細(xì)胞活力顯著下降(P＜0.05)，G組和P組細(xì)胞活力較K組顯著增強(P＜0.05)，G組與P組間細(xì)胞活力無明顯差異(P＞0.05)。
　　 2.K組HUVEC的NF-κ B p65mRNA,Iκ Bα mRNA，MMP-9 mRNA,ICAM-1mRNA表達(dá)水平較N組顯著升高(P＞0.

4、05);相對K組，G組與P組細(xì)胞NF-κ B p65mRNA，Iκ Bα mRNA表達(dá)均降低，且P組比G組降低更加明顯(P＜0.05)。
　　 3.K組HUVEC較N組的NF-κ B p65蛋白表達(dá)顯著升高(P＜0.05)，Iκ Bα蛋白表達(dá)顯著降低(P＜0.05);相對K組，P組與G組NF-κ B p65蛋白表達(dá)均顯著降低(P＜0.05)，且P組比G組降低更加明顯(P＜0.05);與K組比較，G組IκBα蛋白表達(dá)輕微升高，但無

5、統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，P組Iκ Bα蛋白表達(dá)顯著升高(P＜0.05)。
　　 4.HUVEC中MMP-9 mRNA，ICAM-1 mRNA與NF-κB p65mRNA表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.87，P＜0.01; r=0.63，P＜0.01); NF-κB p65蛋白表達(dá)隨IκBα蛋白表達(dá)降低而升高，但相關(guān)性不顯著(R2=0.216);IκBα mRNA表達(dá)與NF-κB p65蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.982，P＜0.