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文檔簡介
1、目的:探討羅格列酮對血管緊張素Ⅱ(Ang Ⅱ)誘導(dǎo)大鼠血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)血管緊張素Ⅱ1型受體(AT<,1>R)和血管緊張素Ⅱ2型受體(AT<,2>R)表達(dá)的影響,為過氧化酶增殖體活化受體γ(PPARγ)激動劑抗炎、抗動脈粥樣硬化(AS)作用提供實驗依據(jù)。 方法:取一月齡雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠的胸主動脈平滑肌細(xì)胞(SMCs),采用組織貼塊法進(jìn)行培養(yǎng)。選6~10代處于對數(shù)生長期的大鼠VSMCs進(jìn)行后續(xù)
2、實驗。首先用終濃度為1μmol·1<'-1>AngⅡ誘導(dǎo)2h后,然后隨機(jī)分成A、B、c組,分別加入終濃度為20、30、50)50μmol·1<'-1>羅格列酮培養(yǎng)12h;另外,取預(yù)先用終濃度為lμmol·1<'-1>AngⅡ誘導(dǎo)6h的大鼠VSMCs,隨機(jī)分為D、E、F組,加入終濃度為30μmol·1<'-1>的羅格列酮分別再培養(yǎng)6h、12h、24 h。采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PeR)和免疫組織化學(xué)方法觀察羅格列酮不同濃度及同
3、一濃度不同的干預(yù)時間對大鼠VSMCs AT<,1>R和AT<,2>R mRNA及蛋白表達(dá)水平的影響。 結(jié)果: 1、基礎(chǔ)狀態(tài)下,體外培養(yǎng)的大鼠VSMCs AT-R和ATzR均有少量的表達(dá)。AngⅡ顯著上調(diào)AT<,1>R mRNA和蛋白表達(dá),下調(diào)AT<,2>R mRNA和蛋白表達(dá)。 2、羅格列酮干預(yù)后,A、B、C組ATIR mRNA和蛋白的表達(dá)均顯著下降,C組下降最大,與干預(yù)前相比均有統(tǒng)計學(xué)差異。D、E、F組AngⅡ
4、誘導(dǎo)的大鼠VSMCs AT<,1>R mRNA和蛋白的高表達(dá)均有不同程度的下調(diào),F(xiàn)組的下調(diào)程度最明顯。 3、羅格列酮明顯上調(diào)AT<,2>R mRNA和蛋白的表達(dá),在C組達(dá)到最大;D、E、F組則不同程度的上調(diào)Ang Ⅱ誘導(dǎo)的大鼠VSMCs AT<,2>R mRNA和蛋白的表達(dá),與D、E組比較,F(xiàn)組的上調(diào)程度最明顯。 結(jié)論: 1、基礎(chǔ)狀態(tài)下,體外培養(yǎng)的大鼠VSMCs內(nèi)AT-R和AT<,2>R均有少量的表達(dá)。Ang Ⅱ
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