十字花科蔬菜提取物抗腫瘤作用的研究.pdf

1、流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，食用十字花科蔬菜能降低人類前列腺癌、肺癌、膀胱癌、食道癌和結(jié)腸癌等的患病危險。異硫氰酸酯是天然存在于十字花科蔬菜中的硫代葡萄糖苷的降解產(chǎn)物。大量的實驗數(shù)據(jù)證明異硫氰酸酯可通過選擇性地使階段Ⅰ酶失活和誘導(dǎo)階段Ⅱ酶的表達(dá)，影響致癌物在體內(nèi)的代謝，而表現(xiàn)出防癌抗癌活性。本論文系統(tǒng)研究了十字花科蔬菜提取物6320(主要為異硫氰酸酯)的體內(nèi)外抗腫瘤活性及其抗腫瘤機理。 采用MTT法檢測對腫瘤細(xì)胞的抑制增殖作用、抗瘤譜，以

2、及對人正常肝細(xì)胞的毒性。結(jié)果表明，提取物6320能顯著抑制體外腫瘤細(xì)胞的增殖，并呈一定的量效關(guān)系。提取物6320對不同的腫瘤細(xì)胞株的IC50為9～28μmol/L，治療指數(shù)為3～10。但是發(fā)現(xiàn)提取物6320對人正常細(xì)胞表現(xiàn)一定的毒性，導(dǎo)致治療指數(shù)相對減小。提取物6320對不同的腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出廣譜的抑制作用，其中對B16最為敏感。 體內(nèi)實驗通過建立小鼠B16實體瘤模型來考察提取物6320的抗腫瘤作用，包括稱取瘤重、測定腫瘤生長曲線

3、。結(jié)果顯示，給藥途徑為灌胃時，提取物6320能明顯抑制體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的生長。給藥組比陰性對照組，瘤體積生長速率慢，且瘤體積小。當(dāng)給藥劑量為120mg/kg/d時，抑瘤率為57.61％，與陽性對照組(CTX)，無顯著性差異(P＞0.05)。但也發(fā)現(xiàn)提取物6320對實驗組小鼠有毒性，當(dāng)給藥劑量為120mg/kg/d時，體重明顯減輕，與陰性對照組相比，脾臟指數(shù)有顯著性差異，但對胸腺指數(shù)則沒有影響。 初步的機理研究揭示了提取物6320通過

4、誘導(dǎo)B16細(xì)胞凋亡起抑制腫瘤生長的作用。在倒置顯微鏡下觀察經(jīng)提取物6320作用48h后的B16細(xì)胞，其細(xì)胞形態(tài)與空白對照組相比有明顯差異。經(jīng)掃描電鏡觀察，細(xì)胞表面的微絨毛在低濃度時部分消失，而在高濃度完全消失，細(xì)胞表面光滑，細(xì)胞膜皺縮外突形成小泡，并進一步脫落成為凋亡小體。使用流式細(xì)胞儀檢測經(jīng)提取物6320作用后的B16細(xì)胞的凋亡率和細(xì)胞周期分布。給藥濃度為2.5、5、7.5μmol/L，凋亡率分別為3.4％、8.2％、11.9％，呈一