西洋參花藥及原生質(zhì)體培養(yǎng)研究.pdf

1、西洋參（Panax quinquefoliusL.）是五加科人參屬名貴中草藥，通過組織培養(yǎng)技術(shù)可以縮短育種年限，為西洋品種選育和種質(zhì)創(chuàng)新奠定理論基礎(chǔ)。本試驗(yàn)以西洋參花藥為材料，在原有試驗(yàn)基礎(chǔ)上，進(jìn)一步分析影響西洋參花藥愈傷組織誘導(dǎo)和分化的因素，建立西洋參花藥植株再生體系;考察組培和大田栽培條件下西洋參葉片解剖結(jié)構(gòu)的差異;并對西洋參花藥愈傷組織進(jìn)行原生質(zhì)體培養(yǎng)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.本試驗(yàn)采用花藥組織培養(yǎng)技術(shù)，對影響西洋參花藥

2、愈傷組織誘導(dǎo)與分化的因素進(jìn)行分析，結(jié)果表明:花藥小孢子發(fā)育時(shí)期、基本培養(yǎng)基類型、激素種類及配比等均能影響其誘導(dǎo)與分化，其中將發(fā)育時(shí)期處于單核中期的花藥小孢子接種在MS基本培養(yǎng)基上，添加3mg/L NAA，1mg/L6-BA時(shí)愈傷組織誘導(dǎo)率最高，為45.43％;將愈傷組織接種在MS+ NAA0.5mg/L+6-BA3mg/L+蔗糖6％+瓊脂0.6％和MS+ NAA0.5mg/L+ KT3mg/L+蔗糖6％+瓊脂0.6％培養(yǎng)基上時(shí)分化率最高

3、，為10％。
　　2.本試驗(yàn)采用石蠟切片技術(shù)，對組培和大田栽培條件下西洋參葉片解剖結(jié)構(gòu)的差異進(jìn)行分析，結(jié)果表明:兩種生長環(huán)境下西洋參葉片細(xì)胞層數(shù)、細(xì)胞大小、排列結(jié)構(gòu)等均有明顯差異;組培和大田栽培條件下，西洋參葉片的氣孔密度分別為74.8/mm2、33.3/mm2，有極顯著差異。
　　3.本試驗(yàn)采用原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)，對影響西洋參原生質(zhì)體游離及培養(yǎng)的因素進(jìn)行分析，結(jié)果表明:酶液配比、酶解時(shí)間、酶解液滲透壓、愈傷組織培養(yǎng)時(shí)間對西洋

4、參原生質(zhì)體游離效果均有影響，愈傷組織培養(yǎng)10～15d，使用2％纖維素酶、0.5％果膠酶，滲壓劑甘露醇濃度為13％，酶解9h時(shí)，西洋參原生質(zhì)體游離效果最好;植板在MS基本培養(yǎng)基上的原生質(zhì)體細(xì)胞增殖快，愈傷組織長勢良好，而植板在B5基本培養(yǎng)基上的原生質(zhì)體則增殖慢，形成愈傷組織后，容易褐化死亡。
　　本試驗(yàn)完善了西洋參花藥組織培養(yǎng)體系獲得了西洋參花藥再生植株，并對組培和大田栽培條件下西洋參葉片解剖結(jié)構(gòu)進(jìn)行了比較分析，初步建立了西洋參原生