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1、以我國(guó)北方工廠化養(yǎng)殖的主要養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)大菱鲆幼魚(yú)(Scophthalmus maximus L.)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,以探究飼料中膽固醇及其與磷脂的交互作用對(duì)大菱鲆幼魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和膽固醇代謝的影響。本文主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
1.飼料膽固醇對(duì)大菱鲆幼魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和膽固醇代謝的影響
本實(shí)驗(yàn)以大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)幼魚(yú)(初始體重5.18±0.01g)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,進(jìn)行為期10周的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)以探究飼料中
2、添加膽固醇對(duì)大菱鲆幼魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和膽固醇代謝的影響。向基礎(chǔ)飼料中添加0.0%、1.0%、1.5%和2.0%的膽固醇,制作成5種等氮等脂的飼料,飼料中膽固醇的最終含量分別為0.38%、0.76%、1.30%、1.80%和2.22%。本實(shí)驗(yàn)中,以膽固醇含量為1.30%、1.80%和2.22%飼料飼喂的大菱鲆幼魚(yú)增重率(WGR)顯著高于以膽固醇含量為0.38%飼料所飼喂的大菱鲆幼魚(yú),但是在膽固醇含量為1.30%、1.80%和2.22%飼料處理
3、組中,大菱鲆幼魚(yú)的WGR并沒(méi)有顯著差異。在所有處理組中,大菱鲆幼魚(yú)的攝食率也沒(méi)有出現(xiàn)顯著的差異。隨飼料膽固醇含量的提高,血清中的總膽固醇(TC)、游離膽固醇(FC)、膽固醇酯(CE)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)都表現(xiàn)出上升的趨勢(shì),但是都在飼料膽固醇含量為1.30%至1.80%時(shí)趨于平穩(wěn)。從肝臟和糞便TC結(jié)果可以看出,只有糞便TC隨飼料膽固醇的提高表現(xiàn)出上升的趨勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)用實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)
4、方法檢測(cè)了肝臟中合成膽固醇關(guān)鍵酶HMG-CoA還原酶和由膽固醇合成膽汁酸的關(guān)鍵酶CYP7A1的相對(duì)表達(dá)量,結(jié)果表明,隨飼料膽固醇含量的增加,肝臟HMG-CoA還原酶的表達(dá)被抑制,但CYP7A1的表達(dá)被顯著提高。同樣用qPCR檢測(cè)了腸和腦Ghrelin的表達(dá)情況,結(jié)果顯示,兩個(gè)組織各處理組之間都沒(méi)有顯著差異??傊?飼料中添加適宜的膽固醇有利于大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng),然而促攝食的效果卻非常有限。大菱鲆體內(nèi)存在膽固醇負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制以維持膽固醇在體內(nèi)
5、的平衡。
2.磷脂和膽固醇的交互作用對(duì)大菱鲆幼魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和膽固醇代謝的影響
本實(shí)驗(yàn)以大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)幼魚(yú)(初始體重5.18±0.01g)為研究對(duì)象,進(jìn)行為期10周的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)以探究飼料中磷脂和膽固醇的交互作用對(duì)大菱鲆幼魚(yú)攝食、生長(zhǎng)和膽固醇代謝的影響。采用3×3的雙因素交互實(shí)驗(yàn),向基礎(chǔ)飼料中分別添加0、2和4%三種梯度的磷脂,在每個(gè)磷脂水平分別設(shè)立0、1和2%三種梯度的膽固醇,制
6、成等氮等脂的九組實(shí)驗(yàn)飼料。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,飼料磷脂和膽固醇對(duì)大菱鲆幼魚(yú)的增重率有顯著的交互作用(P<0.05),隨飼料膽固醇含量的增加,增重率呈現(xiàn)上升趨勢(shì),但未對(duì)攝食率產(chǎn)生顯著交互作用(P>0.05)。磷脂和膽固醇沒(méi)有對(duì)體組成產(chǎn)生顯著的交互作用(P>0.05),但隨飼料膽固醇含量增加,體脂肪顯著上升。同樣地,飼料磷脂和膽固醇也未對(duì)血清總膽固醇、游離膽固醇和膽固醇酯產(chǎn)生顯著交互作用(P>0.05),隨飼料膽固醇含量增加,這幾種膽固醇水平均有
7、明顯的上升趨勢(shì);但是對(duì)于HDL-C和LDL-C這兩種運(yùn)輸膽固醇的重要脂蛋白產(chǎn)生了顯著的交互作用(P<0.05),一般地,隨膽固醇含量的增加,這兩種脂蛋白都有上升趨勢(shì),而隨磷脂含量的增加,兩種脂蛋白都有下降的趨勢(shì)。飼料磷脂和膽固醇對(duì)肝臟和糞便總膽固醇均沒(méi)有產(chǎn)生顯著交互作用(P>0.05),隨飼料膽固醇含量的提高,肝臟和糞便總膽固醇都呈顯著的上升趨勢(shì)。從HMG-CoA還原酶和CYP7A1酶的表達(dá)量情況來(lái)看,飼料磷脂和膽固醇均沒(méi)有對(duì)其產(chǎn)生顯著
8、的交互作用(P>0.05),HMG-CoA還原酶的表達(dá)量隨飼料膽固醇含量的增加受到顯著抑制,而CYP7A1則受到顯著的增強(qiáng)。對(duì)于Ghrelin表達(dá)量的檢測(cè)表明,磷脂和膽固醇僅對(duì)腸Ghrelin產(chǎn)生了顯著的交互作用,而對(duì)腦Ghrelin并沒(méi)有產(chǎn)生顯著的交互作用。因此,通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可以得到磷脂和膽固醇對(duì)大菱鲆幼魚(yú)的增重率具有顯著影響,但是對(duì)于攝食率的影響并不顯著。在膽固醇代謝過(guò)程中,飼料磷脂和膽固醇僅在膽固醇運(yùn)輸方面的HDL-C和LDL-C產(chǎn)
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