人參皂苷Rg3聯(lián)合蘇拉明對小鼠肺癌TGF-β1和ERK信號通路的影響.pdf

1、目的：采用低毒副作用的中藥人參皂苷Rg3和西藥蘇拉明聯(lián)合應用對小鼠Lewis肺癌生長和轉移的抑制作用，并探討其抑瘤的相關作用機制。
　　方法：將40只C57BL6小鼠右大腿內(nèi)側接種Lewis肺癌細胞成瘤后隨機分為5組，分別為對照組、順鉑組、人參皂苷Rg3組、蘇拉明組、人參皂苷Rg3+蘇拉明聯(lián)合組，每組8只。于腫瘤接種第4天開始進行干預，對照組予生理鹽水，順鉑組予3mg／（kg·5d），人參皂苷Rg3組予5 mg／（kg·d），蘇拉

2、明組予10 mg／（kg·d），人參皂苷Rg3+蘇拉明聯(lián)合組（聯(lián)合組）予人參皂苷Rg35 mg／（kg·d）和蘇拉明10 mg／（kg·d）。用藥期間觀察小鼠一般狀態(tài)、藥物不良反應、測小鼠移植瘤生長體積；藥物干預16天后取肺組織，計算肺表面轉移結節(jié)數(shù)，剝?nèi)∫浦擦霾⒎Q重，計算各給藥組的抑瘤率；采用HE染色觀察肺組織病理改變，免疫組化法測移植瘤CD34（即MVD）的表達，RT-PCR法測移植瘤TGF-β1、MEK1/2和ERK1/2的mRN

3、A表達，蛋白質(zhì)印跡法測TGF-β1、MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2的蛋白表達。
　　結果:
　　1．小鼠移植瘤生長及肺轉移情況第12-20天對照組小鼠腫瘤體積增長速度明顯較其他給藥組快，聯(lián)合組增長最慢（P<0.05）。各藥物干預組移植瘤質(zhì)量較對照組低，聯(lián)合組低于其他給藥組（P<0.05），對照組、順鉑組、人參皂苷Rg3組、蘇拉明組、聯(lián)合組腫瘤質(zhì)量分別為（5.60±0.34）g、（4.50±0.40）g、（3.6

4、0±0.31） g、（3.58±0.27）g、（2.82±0.26）g，肺轉移結節(jié)數(shù)分別為7.00±3.02、4.75±2.12、3.13±1.25、2.75±1.67、0.75±0.71，與移植瘤質(zhì)量具一致性（P<0.05），轉移率分別為（8/8、8/8、8/8、7/8、5/8）％，順鉑組、人參皂苷 Rg3組、蘇拉明組、聯(lián)合組抑瘤率分別為19.69%、35.37%、35.85%和49.39%，轉移抑制率分別為32.1%、55.3%、6

5、0.7%、89.3%。人參皂苷Rg3與蘇拉明兩因素兩水平的抑瘤率以及肺轉移抑制率的析因分析提示有交互作用，人參皂苷 Rg3與蘇拉明聯(lián)合應用對抑制小鼠肺癌的生長與轉移具有協(xié)同作用。
　　2．小鼠移植瘤 MVD的表達藥物干預后，各給藥組MVD表達較對照組低，且聯(lián)合組低于其他給藥組（P<0.05），人參皂苷Rg3+蘇拉明聯(lián)合組抑制微血管效果較其單獨應用更明顯，各組 MVD表達分別為24.06±2.40、19.41±1.98、13.06±

6、1.92、12.09±1.49和6.16±1.17。
　　3．藥物干預后小鼠移植 TGF-β1的表達對照組未經(jīng)藥物干預 TGF-β1表達均較其他藥物干預組高，處于高表達狀態(tài)，各藥物組被干預后 TGF-β1的表達下降，且人參皂苷 Rg3和蘇拉明聯(lián)合組下降較其單獨用藥組下降更明顯（P<0.05），各組TGF-β1 mRNA相對量分別為（86.17±8.28）%、（64.69±6.63）%、（49.37±4.24）%、（46.85±4.

7、56）%、（32.08±3.78）%，各組 TGF-β1蛋白的相對量分別為（114.68±17.06）%、（86.40±18.46）%、（65.54±20.02）%、（66.72±18.86）%、（45.79±16.06）%。
　　4．藥物干預對小鼠移植瘤ERK信號通路的影響人參皂苷Rg3和蘇拉明對MEK1/2表達影響小，而是抑制了ERK1/2的表達，且p-ERK1/2明顯被抑制， ERK1/2活化降低；各組MEK1/2 mRNA

8、和各組MEK1/2蛋白表達相對量無明顯差異（P>0.05）；各組 ERK1/2 mRNA相對量分別為（71.93±13.47）%、（56.43±11.01）%、（45.27±8.82）%、（43.29±7.48）%和（28.75±5.41）%；ERK1/2蛋白相對量分別為（104.18±9.78）%、（84.61±7.66）%、（76.71±7.25）%、（74.01±7.41）%和（51.69±5.29）%；p-ERK1/2蛋白相對量

9、分別為（112.96±9.49）%、（87.86±6.77）%、(61.26±8.48)%、（38.60±10.66）%和（9.57±3.42）%。
　　5．各項指標的相關性 MVD、TGF-β1、ERK1/2表達的各項指標與抑瘤率呈直線負相關，與肺轉移結節(jié)數(shù)呈直線正相關，MVD與TGF-β1、ERK1/2表達的各項指標呈直線高度正相關（P<0.05）。
　　結論：
　　1.人參皂苷Rg3、蘇拉明具有抑制小鼠Lewis