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1、苜蓿是重要的飼草作物,同時(shí)在水土保持方面發(fā)揮著重要的作用?;ㄋ幣囵B(yǎng)可以在短時(shí)間內(nèi)獲得加倍單倍體純系,縮短育種年限和提高選擇效率。 為了提高苜?;ㄋ幣囵B(yǎng)效率,以小孢子發(fā)育處于單核中期到單核靠邊期的苜?;ㄋ帪椴牧?,對(duì)花藥培養(yǎng)預(yù)處理方法和培養(yǎng)基進(jìn)行了研究,建立了苜?;ㄋ幣囵B(yǎng)高效再生體系。試驗(yàn)結(jié)果如下: (1)苜?;ㄋ幣囵B(yǎng)適宜的滅菌方法是將花蕾用自來(lái)水流水緩慢沖洗30 min,70﹪酒精浸泡滅菌2 s,接著用0.1﹪升汞溶液浸泡
2、滅菌4 min,最后用無(wú)菌蒸餾水漂洗5次。 (2)接種前花蕾經(jīng)4℃低溫預(yù)處理有利于提高花藥愈傷組織誘導(dǎo)率,其中以預(yù)處理3 d的誘導(dǎo)率最高。 (3)采用固液雙層漂浮培養(yǎng)比固體培養(yǎng)和液體漂浮培養(yǎng)誘導(dǎo)效果好。接種密度以每個(gè)50 mI。三角瓶接種5~10朵小花的花藥為宜。以改良Nitsch2為基本培養(yǎng)基,附加2,4-D 2.0 mg/L和6-BA 0.5 mg/L,麥芽糖6﹪~9﹪的苜?;ㄋ幱鷤M織誘導(dǎo)率較高。 (4)M
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