芽孢桿菌制劑對(duì)小鼠小腸粘膜結(jié)構(gòu)及粘膜免疫的影響研究.pdf

1、本文為探討芽孢桿菌制劑對(duì)小鼠腸粘膜結(jié)構(gòu)及粘膜免疫的影響進(jìn)行了研究。將96只雄性健康小鼠隨機(jī)分為芽孢桿菌PAb04組、芽孢桿菌PAS38組、抗生素組、對(duì)照組4組。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，芽孢桿菌PAb04組、PAS38組和抗生素組分別在基礎(chǔ)日糧中添加10<'6>cfu/g的PAb04、PAS38和20u/g土霉素，分別于飼喂20d、40d、60d后各宰殺8只，采取十二指腸、空腸，測量了小腸粘膜厚度和絨毛長度，并計(jì)算了上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(IEL)的

2、數(shù)量，研究了小腸粘膜中生長抑素(SS)陽性細(xì)胞、IgA日性細(xì)胞、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞及肥大細(xì)胞的分布及其數(shù)量的變化。 1．采用H.E染色方法測量了小腸粘膜厚度和絨毛長度。結(jié)果顯示，芽孢桿菌制劑可顯著增加小腸粘膜厚度和絨毛長度，而抗生素組十二指腸和空腸粘膜厚度和絨毛長度則無顯著變化，推測芽孢桿菌制劑對(duì)小鼠小腸的消化吸收功能具有促進(jìn)作用，并且優(yōu)于抗生素。 2．采用H.E染色計(jì)算了IEL的數(shù)量。結(jié)果表明，芽孢桿菌制劑可

3、以增加小鼠腸道內(nèi)IEL的數(shù)量。在飼喂的整個(gè)過程中，各組小鼠腸道內(nèi)IEL的數(shù)量均有不同程度的升高。飼喂40d后，芽孢桿菌PAS38組十二指腸和空腸中IEL數(shù)量均顯著高于抗生素組和對(duì)照組(P<0～5)；飼喂60d后，芽孢桿菌PAS38組十二指腸和空腸中IEL數(shù)量比對(duì)照組顯著增加(P<0.05)，表明芽孢桿菌PAS38可以增加小鼠腸道內(nèi)IEL的數(shù)量。 3．采用免疫組化技術(shù)(SABC法)分別研究了小鼠小腸中IgA陽性細(xì)胞、CD4+、CD

4、8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化。結(jié)果顯示：在飼喂的整個(gè)過程中，芽孢桿菌PAb04組十二指腸和空腸中 IgA、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞表達(dá)量比對(duì)照組均顯著增加(P<0.05)；而芽孢桿菌PAS38組十二指腸和空腸中IgA、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞表達(dá)量則比對(duì)照組極顯著增加(P<0.01)；而芽孢桿菌PAS38組與抗生素組相比也呈現(xiàn)顯著性。結(jié)果表明，芽孢桿菌制劑尤其是芽孢桿菌PAS38可有效增加小腸中IgA、CD4+T、CD8+T淋巴細(xì)胞

5、的水平，提高機(jī)體的粘膜免疫力，且效果優(yōu)于抗生素。 4．應(yīng)用甲苯胺藍(lán)染色技術(shù)研究了小鼠小腸中肥大細(xì)胞數(shù)量的變化。結(jié)果顯示：飼喂20d后，芽孢桿菌PAb04組空腸中肥大細(xì)胞數(shù)量比對(duì)照組顯著增加(P<0.05)，芽孢桿菌PAS38組則極顯著增加(P<0.01)，芽孢桿菌PAb04組、PAS38組均比抗生素組顯著增加(P<0.05)；飼喂40d后，芽孢桿菌PAS38組十二指腸中肥大細(xì)胞數(shù)量比對(duì)照組顯著增加(P<0.05)；飼喂60d后，

6、芽孢桿菌PAb04組十二指腸中肥大細(xì)胞數(shù)量比對(duì)照組顯著增加(P<0.05)，而芽孢桿菌PAS38組則比對(duì)照組極顯著增加(P<0.01)；芽孢桿菌PAS38組、Pab04組空腸中肥大細(xì)胞數(shù)量均比對(duì)照組極顯著增加(P<0.01)。結(jié)果表明，肥大細(xì)胞的數(shù)量可能反映了消化道粘膜的免疫水平。 5．采用免疫組化技術(shù)(SABC法)研究了小鼠小腸中SS數(shù)量的變化。結(jié)果表明：飼喂 20d后，芽孢桿菌PAS38組十二指腸中SS比對(duì)照組顯著減少(P<

7、0.05)，芽孢桿菌PAb04組、PAS38組比抗生素組則極顯著減少(P<0.01)；芽孢桿菌PAb04組、PAS38組空腸中SS均比對(duì)照組、抗生素組極顯著減少(P<0.01)，并且芽孢桿菌PAS38組比PAb04組顯著減少(P<0.05)；飼喂40d后，芽孢桿菌PAb04組、PAS38組十二指腸中SS均比抗生素組顯著減少(P<0.05)，芽孢桿菌PAb04組比對(duì)照組顯著減少(P<0.05)，芽孢桿菌PAS38組則比對(duì)照組極顯著減少(P