蘿卜種質(zhì)遺傳多樣性的分子標(biāo)記分析.pdf

1、蘿卜（Raphanus sativusL.）是世界上廣泛栽培的蔬菜品種之一。我國蘿卜種質(zhì)資源豐富，是起源地之一。深入研究和合理利用種質(zhì)資源對(duì)開展蘿卜育種工作尤為重要。目前生產(chǎn)上，要求新品種豐產(chǎn)、廣適、多抗及商品性好、品質(zhì)優(yōu)，這些目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)，與掌握的種質(zhì)資源數(shù)量和質(zhì)量密切相關(guān)。為了種質(zhì)創(chuàng)新以及更加有效的利用優(yōu)勢(shì)資源，可以采用多種方法和手段對(duì)蘿卜種質(zhì)資源的遺傳多樣性進(jìn)行系統(tǒng)研究。目前對(duì)于種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究方法頗多，優(yōu)缺點(diǎn)共存。其中，分

2、子標(biāo)記不受季節(jié)、環(huán)境條件等外界因素影響，能直接反映研究材料分子水平差異。所以利用分子標(biāo)記方法研究育種材料間的遺傳差異，為蘿卜雜交育種中親本選配和后代純合性鑒定提供可信度更高的理論依據(jù)，也為蘿卜基因庫的構(gòu)建提供技術(shù)保障。本研究運(yùn)用ISSR、RAPD及RAMP三種分子標(biāo)記，結(jié)合系統(tǒng)聚類分析，對(duì)來源于國內(nèi)外的32份蘿卜種質(zhì)的親緣關(guān)系及遺傳多樣性進(jìn)行分析研究。
　　1選用35個(gè)ISSR隨機(jī)引物，從中篩選出多態(tài)性較好的引物8個(gè)，對(duì)32份蘿卜

3、種質(zhì)進(jìn)行ISSR分析，擴(kuò)增共產(chǎn)生條帶82條，其中69條多態(tài)性帶，多態(tài)性比率為84.1％，平均每個(gè)引物產(chǎn)生多態(tài)性條帶8.6條;系統(tǒng)聚類分析將32份種質(zhì)分為4大類群，第一大類群由28個(gè)品種組成，又分為3個(gè)亞組，第二大類群由MTHS單獨(dú)組成，第三大類群由LYDHP和LSHLB組成，紅皮紅心的YZLB單獨(dú)聚為第四大類群。
　　2選用隨機(jī)引物48個(gè)，篩選出多態(tài)性較好的6個(gè)，對(duì)來源不同的32份蘿卜種質(zhì)差異性進(jìn)行RAPD標(biāo)記分析，擴(kuò)增產(chǎn)生總帶數(shù)

4、58條，多態(tài)性帶為50條，多態(tài)性比率為86.2％，平均每個(gè)引物產(chǎn)生多態(tài)性帶8.3條;系統(tǒng)聚類分析將供試材料分為4大類組，第一大組包括16份材料，又可分為4個(gè)亞組，第二大組11份材料，又可分為3個(gè)亞組，第三大組包括4份材料，以綠皮蘿卜為主。
　　3選用96對(duì)RAMP引物，篩選出8對(duì)引物組合對(duì)32份蘿卜種質(zhì)遺傳多樣性進(jìn)行了RAMP分析，結(jié)果擴(kuò)增產(chǎn)生總條帶122條，多態(tài)性帶113條，多態(tài)性比率92.6％，平均每對(duì)引物產(chǎn)生多態(tài)性條帶高達(dá)1

5、4.1條;系統(tǒng)聚類分析將供試材料分為3個(gè)組，第一組包括29份材料，第一組由QTQ和FLXX組成，第三組由MTHS材料單獨(dú)構(gòu)成。
　　4綜合三種標(biāo)記結(jié)果進(jìn)行聚類分析表明，單個(gè)標(biāo)記與綜合聚類結(jié)果不完全一致，但是都與形態(tài)標(biāo)記分類基本一致。都能將MTHS材料單獨(dú)聚類;將來源于重慶周邊地區(qū)的CBL類型、FT類蘿卜基本聚在同一大類，親緣關(guān)系表現(xiàn)很近;將JG與BJSG、根形長(zhǎng)柱形的白皮蘿卜JSNBZ和ZDC及YCLBF、LSHLB和LYDHP等