西妥昔單抗聯(lián)合熱療及放療誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE凋亡實驗研究.pdf

1、第一部分：西妥昔單抗誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE凋亡實驗研究 目的：觀察西妥昔單抗誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE凋亡的效果，并初步探討其可能機(jī)制。 方法：MTT法測定西妥昔單抗對CNE細(xì)胞株20～30％抑制的工作濃度；以該濃度藥物作用CNE細(xì)胞，透射電鏡、Hochest33258熒光染色法觀察其凋亡形態(tài)學(xué)變化，流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡率；westernblot檢測Bax、Bcl-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：西妥昔單抗對CNE細(xì)胞株的工

2、作濃度(IC20～30)為10ug/ml；CNE細(xì)胞經(jīng)西妥昔單抗處理后，電鏡、熒光顯微鏡下均可見典型的凋亡形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)改變；流式細(xì)胞術(shù)顯示24、48h凋亡率分別為14.30±0.78％、15.30±0.95％，顯著高于對照組(P<0.05)；westernblot檢測顯示Bax蛋白表達(dá)上調(diào)、Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)、Bax/Bcl-2比值增加。結(jié)論：西妥昔單抗對人鼻咽癌細(xì)胞株CNE有顯著的凋亡誘導(dǎo)作用，這可能與其上調(diào)Bax/Bcl-2

3、比值促進(jìn)凋亡有關(guān)。 第二部分：西妥昔單抗聯(lián)合熱療誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE凋亡實驗研究 目的：觀察西妥昔單抗聯(lián)合熱療誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE凋亡的效果，并初步探討其可能的機(jī)制。 方法：試驗分單靶組、單熱組及熱靶組，Hochest33258熒光染色法觀察CNE細(xì)胞株各處理組細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡率；westernblot檢測CNE細(xì)胞株不同處理后Bax、Bcl-2、EGFR以及熱療后不同時間EGFR蛋

4、白的表達(dá)。 結(jié)果：熒光染色法觀察到CNE細(xì)胞發(fā)生典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變，以熱靶組更為顯著；流式凋亡檢測顯示熱靶組凋亡率顯著高于單靶組、單熱組及對照組(P<0.05)；westernblot檢測顯示各處理組較之對照組都有上調(diào)Bax/Bcl-2比值、下調(diào)EGFR蛋白表達(dá)作用，以熱靶組最為顯著(P<0.05)；熱療后隨時間的延長，EGFR蛋白表達(dá)逐漸下調(diào)。 結(jié)論：西妥昔單抗聯(lián)合低溫?zé)岑熌茱@著增加CNE細(xì)胞的凋亡率，這可能與EGF

5、R的下調(diào)與受抑，進(jìn)而調(diào)變Bax/Bcl-2比值進(jìn)一步促進(jìn)凋亡有關(guān)。 第三部分：西妥昔單抗聯(lián)合放療及熱療誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE凋亡實驗研究 目的：觀察西妥昔單抗聯(lián)合放療及低溫?zé)岑燇w外誘導(dǎo)人鼻咽癌細(xì)胞株CNE凋亡的效果，并初步探討其可能的機(jī)制。 方法：試驗分對照組、單放組、熱放組、靶放組及熱靶放組，Hochest33258熒光染色法觀察CNE細(xì)胞株細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡率；Westernblot檢測各組B

6、ax、Bcl-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：熒光染色法觀察到CNE細(xì)胞發(fā)生典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變，以靶放熱組更為顯著；流式凋亡檢測顯示各照射劑量下靶放熱組凋亡率顯著高于對照組及相應(yīng)單放組、熱放組、靶放組(P<0.05)；westernblot檢測顯示各處理組較之對照組都有上調(diào)Bax/Bcl-2比值，以靶放熱組最為顯著(P<0.05)。 結(jié)論：西妥昔單抗聯(lián)合放療和低溫?zé)岑燂@著增加CNE細(xì)胞的凋亡率，這可能與其上調(diào)Bax/Bcl-2比值進(jìn)