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文檔簡(jiǎn)介
1、背景與目的:
結(jié)直腸癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率分別位居全世界惡性腫瘤的第3位和第4位,因此,探討結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制、尋找結(jié)直腸癌的防治方法,是目前亟待解決的問題。結(jié)直腸癌的發(fā)生是多種因素共同作用的結(jié)果,其發(fā)生發(fā)展與基因改變有著密切的關(guān)系,DNA甲基化是腫瘤發(fā)生的一個(gè)重要表觀遺傳學(xué)機(jī)制,通過使抑癌基因失活參與腫瘤的發(fā)生過程。DAPK基因是一種細(xì)胞凋亡的正性調(diào)節(jié)基因,編碼一類新型鈣離子/鈣調(diào)素依賴激酶,可被F
2、as、E2F、P53、P16、神經(jīng)酰胺等多種因子激活而參與細(xì)胞凋亡過程。FHIT基因的編碼蛋白具有三腺苷三磷酸(AP3A)水解酶的活性,通過調(diào)控細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制腫瘤的發(fā)生。研究證實(shí)DAPK和FHIT基因在多種腫瘤中表達(dá)下調(diào),是公認(rèn)的抑癌基因,但關(guān)于聯(lián)合檢測(cè)兩基因甲基化水平的研究在國(guó)內(nèi)外罕見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用甲基化特異性PCR檢測(cè)46例結(jié)直腸癌及46例正常結(jié)直腸組織中DAPK和FHIT基因的甲基化狀態(tài),以期探討兩基因異常甲基化在結(jié)
3、直腸癌發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移中的作用以及與臨床病理特征的關(guān)系。
方法:
1.甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)本實(shí)驗(yàn)采用該方法檢測(cè)結(jié)直腸癌組織及正常結(jié)直腸組織各46例中DAPK、FHIT基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化水平,并分析兩基因甲基化水平與性別、年齡、分化程度、腫瘤部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期之間的關(guān)系以及DAPK和FHIT基因甲基化水平的相關(guān)性。
2.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理利用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
4、采用x2檢驗(yàn)和spearman關(guān)聯(lián)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1.DAPK基因在結(jié)直腸癌組織和正常結(jié)直腸組織中的甲基化率分別為60.87%、13.04%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=22.58,P<0.05);其甲基化水平與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05),而與性別、年齡、腫瘤部位及臨床分期無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。
2.FHIT基因在結(jié)直腸癌組織和正常結(jié)直腸組織中的甲基化率
5、分別為54.35%、8.69%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=22.21,P<0.05);其甲基化水平與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05),而與性別、年齡、腫瘤部位及臨床分期無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。
3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示:結(jié)直腸癌DAPK和FHIT基因甲基化發(fā)生率呈正相關(guān)(r=0.393,P<0.05)。
結(jié)論:
1.結(jié)直腸癌中DAPK、FHIT基因甲基化率明顯高于正常結(jié)直腸組織,且與分化程度、淋巴
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