枳椇子水提取液對乙醇體外誘導(dǎo)的脂肪變性肝細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:建立不同濃度乙醇體外誘導(dǎo)的肝細(xì)胞脂肪變性模型，并探討不同濃度乙醇對L-02肝細(xì)胞脂肪合成及肝酶泄漏量的影響。并確定枳椇子水提取液對乙醇體外誘導(dǎo)的肝細(xì)胞脂肪變性及損傷是否有防治作用。
　　 方法:采用MTT法篩選乙醇誘導(dǎo)肝細(xì)胞脂肪變性的適宜濃度(0.3％、0.6％、1.2％、2.4％)，選擇最適濃度的枳椇子水提取液對其進(jìn)行干預(yù)，光學(xué)顯微鏡觀察不同組別油紅O染色情況，全自動生化儀檢測細(xì)胞培養(yǎng)基中ALT、AST酶泄露量，試劑盒檢

2、測各組細(xì)胞內(nèi)甘油三酯(TG)水平，采用半定量RT-PCR法檢測各組SREBP-1c表達(dá)量。
　　 結(jié)果:
　　 1．用MTT法篩選出當(dāng)乙醇濃度為0.1％、0.2％時(shí)細(xì)胞成活率比使用正常培基稍增高，當(dāng)乙醇濃度大于0.3％時(shí)，細(xì)胞存活率隨濃度升高而降低，當(dāng)乙醇濃度大于2.4％時(shí)，與正常組相比細(xì)胞存活率下降最明顯(P<0.05)。
　　 2．肝細(xì)胞在加入乙醇的培基中培養(yǎng)大于或等于48小時(shí)，油紅O染色可見不同組別細(xì)胞胞漿

3、內(nèi)均有大量大小不一被染成橘紅色的脂滴。如同時(shí)加入枳椇子水提取液共同培養(yǎng)48小時(shí)，橘紅色的脂滴數(shù)目變少且顏色變淡。
　　 3．用乙醇干預(yù)后ALT、AST、TG均比正常組升高(P<0.05)，枳椇子水提取液共同培養(yǎng)48小時(shí)則均有所下降(P<0.05)。
　　 4．各濃度乙醇組肝細(xì)胞SREBP-lc表達(dá)隨乙醇濃度升高而升高(P<0.05)，枳椇子水提取液共同培養(yǎng)48小時(shí)則均有所下降(P<0.05)。
　　 結(jié)論:

4、>　　 1．在一定濃度范圍內(nèi)，低濃度的乙醇可能對肝細(xì)胞的生長起促進(jìn)作用，超出一定范圍后，乙醇濃度越高對肝細(xì)胞損傷越大。
　　 2．乙醇單獨(dú)作用于肝細(xì)胞即可致肝細(xì)胞發(fā)生脂肪變性。隨乙醇作用濃度增高，肝細(xì)胞會隨SREBP-1cmRNA表達(dá)上調(diào)而發(fā)生不同程度的脂肪變性，且脂變程度和損傷程度均隨乙醇濃度增高而加重。
　　 3．枳椇子水提取液能減低乙醇對肝細(xì)胞的損害，并通過降低SREBP-1cmRNA的表達(dá)從而降低肝細(xì)胞內(nèi)脂肪含