祛瘀化痰湯防治大鼠肝纖維化的實驗研究.pdf

1、目的:觀察、研究中藥復(fù)方制劑祛瘀化痰湯對實驗性大鼠肝纖維化的預(yù)防及治療作用,并探討其可能的作用機制,為臨床推廣、運用活血化痰法防治肝纖維化提供科學(xué)、可靠的實驗依據(jù).方法:采用 40％四氯化碳(CCL4)皮下注射誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型.將健康Wistar大鼠60只隨機分為:(1)正常對照組(6只);(2)中藥預(yù)防組(15只);(3)模型對照組(12只);(4)中藥治療組(15只);(5)模型自然恢復(fù)組(12只). 正常對照組不造模,其余各組

2、均造模.正常對照組予生理鹽水灌胃8周,模型對照組、中藥預(yù)防組造模同時分別予生理鹽水及祛瘀化痰湯灌胃8周,模型自然恢復(fù)組、中藥治療組造模后分別予生理鹽水、祛瘀化痰湯灌胃4周.實驗結(jié)束后處死各組大鼠采取血清及肝組織標本檢測如下指標:血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血清白蛋白(ALb)、血清球蛋白(GLb);血清透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、C-Ⅳ型膠原(C-Ⅳ);血清丙二醛(MDA)含量及血清超氧化物

3、歧化酶(SOD)活力;免疫組織化學(xué)染色法觀察肝組織α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達、分布,并做半定量分析;病理切片HE及VG染色觀察病理組織學(xué)變化及肝組織膠原纖維增生程度;透射電鏡觀察肝組織超微結(jié)構(gòu)改變及Disse間隙膠原沉積情況.結(jié)果:(1)模型對照組及模型自然恢復(fù)組大鼠血清氨基轉(zhuǎn)移酶活性、球蛋白水平及C-Ⅳ膠原、透明質(zhì)酸、層粘連蛋白含量、血清MDA含量明顯增高,血清白蛋白水平及SOD活性明顯降低,肝細胞變性、壞死、炎癥反應(yīng)及肝

4、組織纖維增生顯著,匯管區(qū)及小葉間有大量增生的膠原纖維,向小葉 內(nèi)延伸,形成纖維間隔,部分切片可見寬大的纖維間隔包饒、分割肝小葉形成大小不等、形狀不規(guī)則的假小葉.免疫組織化學(xué)染色顯示模型對照組及模型自然恢復(fù)組肝組織α-SMA表達、分布分別較中藥預(yù)防組及治療組明顯增多,染色加深.(2)祛瘀化痰湯能顯著降低中藥預(yù)防組及治療組大鼠血清氨基轉(zhuǎn)移酶活性、球蛋白水平及C-Ⅳ膠原、透明質(zhì)酸、層粘連蛋白含量,提高血清白蛋白水平及SOD活性,降低血清MDA

5、含量,減輕肝細胞變性、壞死及炎癥反應(yīng)-,降低肝組織纖維增生程度,肝組織纖維增生不明顯,一般僅局限于匯管區(qū),少數(shù)匯管區(qū)纖維化擴大,但局限于竇周及小葉內(nèi),極少數(shù)發(fā)生匯管區(qū)周圍纖維化,形成少量細小、菲薄的纖維間隔,但小葉結(jié)構(gòu)保留.免疫組織化學(xué)染色顯示:中藥預(yù)防組及治療組肝組織α-SMA表達、分布分別較模型對照組及模型自然恢復(fù)組明顯減少,染色減輕.(3)以上血清學(xué)肝功能指標、肝纖維化血清學(xué)指標、血清SOD活性、MDA含量及膠原纖維增生程度評分、

6、肝組織α-SMA表達、分布情況評分,中藥預(yù)防組與模型對照組、中藥治療組與模型自然恢復(fù)組間比較均存在顯著性差異(P<0.01,P<0.05).各指標直線相關(guān)分析結(jié)果如下:血清MDA與ALb呈負相關(guān)(r=-0.804,P<0.05),血清HA與ALb呈負相關(guān)(r=-0.737,P<0.05),血清LN與ALb 呈負相(r=-0.675,P<0.05),血清SOD活性與AST活性呈負相關(guān)(r=-0.804,P<0.05),血清MDA含量與AS