褪黑素對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠腸道黏膜損傷的影響.pdf

1、目的:
　　 本文的目的是通過研究褪黑素在大鼠重癥急性胰腺炎(severe acutepancreatitis，SAP)模型中對(duì)腸道黏膜完整性的保護(hù)作用，明確褪黑素能否改善腸道屏障功能障礙及降低腸道細(xì)菌移位從而降低重癥急性胰腺炎早期死亡率。
　　 方法:
　　 40只SD大鼠被隨機(jī)分成3組:假手術(shù)（對(duì)照，sham operation，SO）組8只，重癥急性胰腺炎(SAP)組18只，褪黑素治療(melatonin

2、treatment，MT)組由14只已誘導(dǎo)重癥急性胰腺炎模型的SD(Sprague-Dawley)大鼠組成。SAP組模型是通過夾閉大鼠肝膽管后以逆行注射4％牛黃膽酸鈉（1 mL/kg體重）至胰膽管的方式建造而成。MT組模型的建造是通過誘導(dǎo)SAP模型前，即牛黃膽酸鈉注射前30min事先給予腹腔內(nèi)注射褪黑素（50 mg/kg體重）而成。SO組大鼠麻醉后開腹，翻動(dòng)胰腺及腸管再關(guān)腹即可。3組大鼠均在造模后24小時(shí)時(shí)被處死。分別收集血液樣本及末端

3、回腸組織樣本，提取血清樣本及碾碎回腸組織后離心提取上層清液，采用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA)法分別測(cè)定血清二胺氧化酶(diamine oxidase，DAO)及腸道黏膜組織二胺氧化酶濃度水平。對(duì)比分析各組大鼠血清二胺氧化酶和腸道黏膜組織二胺氧化酶濃度。收集血液樣本，提取血液中DNA，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法(real-time fluorescence quant

4、itative polymerase chain reaction, RT-FQ-PCR)測(cè)定大鼠下腔靜脈血中大腸桿菌通用型基因O157（循環(huán)熒光域值，Ct值）。再對(duì)比分析各組大鼠下腔靜脈血大腸桿菌通用型基因O157的檢出率。運(yùn)用透射電鏡分析小腸微絨毛的超微結(jié)構(gòu)及測(cè)定微絨毛高度和隱窩深度。對(duì)比分析各組大鼠小腸微絨毛高度及隱窩深度。
　　 結(jié)果:
　　 SAP組大鼠血清二胺氧化酶濃度顯著高于MT組，而MT組大鼠血清二胺氧化

5、酶濃度顯著高于SO（對(duì)照）組。SAP組大鼠回腸組織二胺氧化酶濃度顯著低于MT組，而MT組大鼠回腸組織二胺氧化酶濃度顯著低于SO組。MT組大鼠下腔靜脈血中測(cè)得的大腸桿菌通用型DNA(deoxyribonucleic acid)檢出率明顯低于SAP組。SO大鼠下腔靜脈血中未檢測(cè)到大腸桿菌通用型DNA。MT組和SO組大鼠回腸組織微絨毛高度及隱窩深度均明顯大于重癥急性胰腺炎組，SO組大鼠回腸組織微絨毛高度及隱窩深度均明顯大于MT組。