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文檔簡介
1、目的:研究虎杖苷對大鼠腎缺血再灌注損傷P38絲裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)及p38mRNA表達的影響。
方法:將36只清潔雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為6組:I假手術組;II生理鹽水對照組;III預處理低劑量組;IV預處理高劑量組;V缺血后處理低劑量組;VI缺血后處理高劑量組。高劑量組和低劑量組分別予以虎杖苷(polydat
2、in,PD)40 mg/ml及20 mg/ml股靜脈注射。采取右腎切除,左側腎蒂鉗夾的方法建立損傷模型,夾閉時間為60分鐘,再灌注時間為24小時。用免疫組織化學方法觀察p38MAPK染色情況;并采用實時熒光定量PCR技術(real time quantitative polumerasechain reaction,RT-qPCR)檢測p38MAPK mRNA的表達,用計算機定量分析。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對實驗結果進行統(tǒng)計分析,將
3、各處理組數(shù)據(jù)結果分別與假手術組及對照組進行比較,根據(jù)比較結果確定是否存在顯著性差異,判定療效。
結果:
1.各組間P38MAPK表達的比較(-x±SD):p<0.05為有顯著性差異;p=0.00(<0.05),表示P38MAPK比較的結果有顯著性差異,有統(tǒng)計學意義。
2.各組P38mRNA表達的比較結果(-x±SD):p<0.05為有顯著性差異;p=0.00(<0.05),表示P38mRNA比較
4、的結果有顯著性差異,有統(tǒng)計學意義。
3.各組P38mRNA結果兩兩比較(P值):
①對照組與假手術組相比較,p=0.00(<0.05),說明二者有顯著性差異,說明對照組P38mRNA表達明顯升高,提示對照組造成了再灌注損傷。
②預處理低劑量組與假手術組相比較,p=0.43(>0.05),二者之間沒有顯著性差異,說明預處理低劑量組的P38mRNA表達升高不明顯;
預處理低劑量組與對照
5、組相比較,p=0.01(<0.05),二者有顯著性差異,說明預處理低劑量組的P38mRNA表達升高不明顯,提示預處理低劑量組減輕了腎缺血再灌注的損傷。
③預處理高劑量組與假手術組相比較,p=0.10(>0.05),二者之間沒有顯著性差異,說明預處理高劑量組的P38mRNA表達升高不明顯;
預處理低劑量組與對照組相比較,p=0.04(<0.05),二者有顯著性差異,說明預處理高劑量組的P38mRNA表達升高不明
6、顯,提示預處理高劑量組減輕了腎缺血再灌注的損傷;預處理高劑量組與預處理低劑量組相比較,p=0.38(>0.05),說明二者降低P38mRNA表達的作用不存在劑量上的差異,提示二者減輕損傷的作用不存在劑量上的差異。
④缺血后處理低劑量組與假手術組相比較,p=0.00(<0.05),說明二者之間沒有顯著性差異,提示缺血后處理低劑量組造成了缺血再灌注損傷,同時,缺血后處理低劑量組與對照組相比較,p=0.60(>0.05),說明缺
7、血后處理低劑量組P38mRNA表達明顯升高,提示缺血后處理低劑量組不能減輕缺血再灌注損傷程度;
⑤缺血后處理高劑量組與假手術組相比較,p=0.01(<0.05),說明二者之間沒有顯著性差異,提示缺血后處理低劑量組造成了缺血再灌注損傷,提示缺血后處理高劑量組不能減輕損傷程度。
4.腎組織病理評分(-x±SD):p<0.05為有顯著性差異;p=0.00(<0.05),說明各組腎組織病理評分具有組間顯著性差異。
8、r> 5.各組腎組織病理評分兩兩比較(p值):
①對照組與假手術組相比較,p=0.00(<0.05),說明二者有顯著性差異,說明對照組造成了腎組織損傷。
②預處理低劑量組與假手術組相比較,p=0.06(>0.05),說明預處理組沒有造成明顯的腎組織損傷;
預處理低劑量組與對照組相比較,p=0.00(<0.05),二者有顯著性差異,說明預處理低劑量組明顯減輕了腎組織損傷程度。
9、③預處理高劑量組與假手術組相比較,p=0.07(>0.05),二者之間沒有顯著性差異,說明預處理高劑量組造成的損傷不明顯;
預處理低劑量組與對照組相比較,p=0.00(<0.05),二者有顯著性差異,說明預處理高劑量組明顯減輕了損傷程度;
預處理高劑量組與預處理低劑量組相比較,p=0.95(>0.05),說明二者減輕腎組織損傷的作用不存在劑量上的差異。
④缺血后處理低劑量組與假手術組相比較,p=
10、0.00(<0.05),說明二者之間沒有顯著性差異,提示缺血后處理低劑量組造成了腎組織損傷;
⑤缺血后處理高劑量組與假手術組相比較,p=0.00(<0.05),說明二者之間沒有顯著性差異,提示缺血后處理低劑量組造成了明顯腎組織損傷。
結論:
1.正常腎組織P38MAPK不表達或僅有少量表達,對照組P38MAPK表達較假手術組明顯升高,說明缺血再灌注導致腎組織中P38MAPK活化;預處理低劑量組及
11、預處理高劑量組均能明顯抑制腎缺血再灌注損傷引起的P38MAPK過度表達,而且,二者之間不存在明顯的量效差異。缺血后處理低劑量組及缺血后處理高劑量組均不能下調P38MAPK的表達。
2.正常腎組織P38mRNA不表達或僅有少量表達,對照組P38mRNA表達較假手術組明顯升高,說明缺血再灌注導致P38mRNA表達活化,預處理低劑量組及預處理高劑量組均能明顯抑制腎缺血再灌注損傷引起的P38mRNA過度表達,而且,二者之間不存在明
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