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文檔簡介
1、論文以獲得高活力外源β-葡萄糖苷酶及開發(fā)利用發(fā)酵液殘渣酵母為目標(biāo),以基因工程菌GS115 bgl1為菌株,研究了β-葡萄糖苷酶誘導(dǎo)表達(dá)的適宜條件及其酶學(xué)特性;在此基礎(chǔ)上,進(jìn)行了5L發(fā)酵罐放大發(fā)酵實驗;并就如何利用發(fā)酵液中的酵母進(jìn)行了探索性的研究。結(jié)果表明:
基因工程菌GS115 bgl1誘導(dǎo)表達(dá)β-葡萄糖苷酶的適宜條件為:FM21培養(yǎng)基的pH為6.0,組氨酸和PTM1的加入量分別為0.1%和0.4%,接種量為6%,每24h
2、添加一次1%甲醇。此外,添加硫酸銨,磷酸二氫鉀,Tween80,油酸可提高β-葡萄糖苷酶的酶活。
發(fā)酵罐的高密度發(fā)酵結(jié)果表明,甲醇誘導(dǎo)72h后,β-葡萄糖苷酶活可達(dá)145 IU/mL,蛋白表達(dá)量可達(dá)7500mg/L。與搖瓶相比,最高酶活及胞外蛋白表達(dá)量分別提高了1.87倍和1.79倍,是出發(fā)菌株黑曲霉產(chǎn)酶能力的33.6倍,實現(xiàn)了β-葡萄糖苷酶的高效表達(dá)。
利用濃鹽法提取發(fā)酵液殘渣酵母中的核酸時,核酸得率為1.
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