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1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文RNA干擾抑制Survivin基因?qū)θ烁伟〩epG2細胞增殖的影響姓名:楊敬敬申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:于壯20090524EffectofRNAInterferenceTargetingSurvivinGeneontheproliferationofHepatocellularCarcinomaCellLineHepG2AbstractObjective:Toobservetheeffectofthe
2、RNAinterferencetargetingsurvivingeneexpressiononproliferationinhepatocellularcarcinomacellHepG2andtoinvestigatethefeasibilityoftreatmentonhepatomawithRNAinterferencetargetingsurvivingeneMethods:Threedifferentsurvivingene
3、sequencespecificshRNAvectorspshRNAsurvivin一323/387/52wereconstructedTransfectionofshRNAvectorswasperformedusingtheLipofectmine2000liposomeItseffectsonthecellswereevaluatedbydetectingfollowingindexes:(1)Theexpressionofsur
4、vivinmRNAWasdetectedbyReversetranseriptionpolymerasechainreaction(RTPCR)ThespecificityofRNAinterferencewasanalyzed;(2)ThevectorwhichcouldsignificantlydownregulatetheexpressionofsurvivinwastransfectedintoHepG2cellsbyLipof
5、ectmine2000liposomeRTPCRwasemployedtodetecttheexpressionofsurvivingene24h,48hand72haftertransfectionThetime●’effectofRNAinterferenceWasanalyzed;(3)TheproliferationofHepG2ceilswasassessedbyMTTassayResults:(1)RTPCRshowedth
6、atthepshRNA—survivin一387vectortargetingsurvivingenecansignificantlydownregulatedtheexpressionofitsmRNAinHer’G2cellswhencomparingwiththatofthecontrols(P005)(2)RTPCRshowedthattheexpressionofsurvivinmRNAbegantodecrease24haf
7、tertransfection;andthemostapparentinterferingefficiencywasat48haRertransfection;at72haftertransfection,theexpressionrestored、(3)MTTassayshowedtheproliferationofHepG2cellsWasinhibitedConclusion:ThepshRNA—survivin387vector
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