蘿卜花芽分化、抽薹與內(nèi)源激素和DNA甲基化關(guān)系的初步研究.pdf

1、花芽分化是植物成花的基礎(chǔ)，抽薹在花芽分化及發(fā)育過程的中途便開始，與花芽分化有不可分的關(guān)系，關(guān)于成花機(jī)理方面的研究不斷深入，植物激素控制成花的研究越來越多，近年來關(guān)于DNA甲基化與植物生長(zhǎng)發(fā)育轉(zhuǎn)變的研究日益成為關(guān)注的焦點(diǎn)。 本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定了三個(gè)春蘿卜品系(04-358，04-565，04-566)在現(xiàn)蕾抽薹過程中頂端生長(zhǎng)點(diǎn)處嫩葉中幾種主要內(nèi)源激素GA<,4>、IAA、iPA和ABA含量的變化情況。發(fā)現(xiàn)在

2、現(xiàn)蕾抽薹過程中，GA<,4>含量在現(xiàn)蕾點(diǎn)存在明顯的峰值，表明GA<,4>與現(xiàn)蕾抽薹密切相關(guān)：內(nèi)源ABA含量變化與GA<,4>變化趨勢(shì)基本一致；抽薹過程中葉片中IAA含量相對(duì)較低；iPA含量在現(xiàn)蕾期逐步增加，至抽薹中后期出現(xiàn)一高峰值。激素平衡比單一激素對(duì)蘿卜抽薹開花的影響更大，研究發(fā)現(xiàn)iPA／ABA值增大，GA<,4>／iPA和GA<,4>／IAA值變小有利于花芽分化后植株的抽薹開花。 對(duì)蘿卜基因組DNA的MSAP關(guān)鍵步驟進(jìn)行了優(yōu)

3、化并應(yīng)用于抽薹和花芽分化過程中甲基化樣式分析。在優(yōu)化體系的基礎(chǔ)上，使用18對(duì)引物分析了春蘿卜品種NAULbsg-2003-6現(xiàn)蕾抽薹過程中DNA甲基化水平的變化情況，結(jié)果表明在未現(xiàn)蕾—現(xiàn)蕾—抽薹過程中基因組DNA甲基化水平先降低，隨著花莖的伸長(zhǎng)DNA甲基化水平又逐漸上升，各個(gè)時(shí)期，CCGG內(nèi)側(cè)胞嘧啶完全甲基化程度均高于半甲基化的程度。 對(duì)‘短葉13’在花芽分化過程中基因組DNA甲基化模式分析，表明：種子基因組DNA甲基化水平最高

4、，達(dá)到30.2％，而在花芽分化過程中，葉片DNA的甲基化水平逐漸上升(14.7％<16.6％<16.996<17.5％)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)許多去甲基化和重新甲基化位點(diǎn)，部分?jǐn)U增譜帶的強(qiáng)弱揭示了在蘿卜中存在的特異重復(fù)序列。分析結(jié)果表明，MSAP技術(shù)在檢測(cè)蘿卜花芽分化過程中5-<'m>C的程度具有敏感性高和特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。 利用去甲基化試劑5-azaC結(jié)合低溫處理(4.0℃，15d)蘿卜幼苗，并測(cè)定了幼苗處理后蘿卜在生長(zhǎng)過程中某一時(shí)期的形態(tài)