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1、目的:研究大鼠肝熱缺血再灌注損傷時(shí)的細(xì)胞凋亡現(xiàn)象和線粒體功能的損傷,及抗氧化劑褪黑素(melatonin)減輕線粒體損傷和抗凋亡作用?! 》椒ǎ哼x用成年Sprague-Dawley大鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)組(shamoperation)、肝缺血再灌注損傷模型組(HIRI組)和褪黑素干預(yù)組(MT組)。其中MT組又按給藥時(shí)間分為缺血前給藥組和再灌注前給藥組。建立大鼠HIRI模型后,于不同的時(shí)間點(diǎn)處死大鼠后取材。肝組織分別行HE染色觀察組織病理
2、變化,電鏡觀察肝細(xì)胞凋亡和線粒體結(jié)構(gòu)的改變,TUNEL技術(shù)測(cè)定肝細(xì)胞凋亡程度,DiOC6(3)標(biāo)記,流式細(xì)胞儀測(cè)定線粒體膜電位的改變。提取線粒體測(cè)定其MDA、GSH變化,下腔靜脈取血測(cè)定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)變化,并比較各組之間的差別。 結(jié)果:1、缺血再灌注組肝細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于假手術(shù)組;同時(shí)線粒體內(nèi)MDA水平增高,GSH減少,伴隨膜電位的降低;MT處理組凋亡率則明顯低于HIRI組,線粒體膜電位高
3、于HIRI組,伴隨GSH的升高和MDA減少。各組間的差別有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05)2、HIRI組血清ALT和AST明顯高于假手術(shù)組,而MT處理組血清ALT和AST明顯低于HIRI組。各組間的差別有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05)。3、HIRI組病理?yè)p傷明顯較假手術(shù)組嚴(yán)重,MT處理組病理?yè)p傷則明顯輕于HIPI組?! 〗Y(jié)論:1、肝臟在缺血再灌注時(shí)出現(xiàn)嚴(yán)重的細(xì)胞凋亡,細(xì)胞的凋亡是組織缺血再灌注損傷的結(jié)果或表現(xiàn)形式。同時(shí)伴隨線粒體膜電位的降低和脂質(zhì)過
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