外源性p16基因?qū)雽?duì)人肝癌細(xì)胞侵襲相關(guān)蛋白表達(dá)和遷移能力的影響.pdf

1、目的:探討外源性p16基因?qū)雽?duì)人原發(fā)性肝癌SMMC-7721細(xì)胞侵襲相關(guān)蛋白VEGF、nm23、MMP-9及TIMP-1表達(dá)和其遷移能力的影響。
　　方法:細(xì)胞劃痕和Transwell法檢測(cè)外源性p16基因?qū)雽?duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721遷移能力的影響;免疫細(xì)胞化學(xué)法分析外源性p16基因?qū)雽?duì)VEGF表達(dá)的影響;Western blot法分析外源性p16基因?qū)雽?duì)nm23、MMP-9和TIMP-1表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:

2、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)顯示,外源性p16基因?qū)肴烁伟┘?xì)胞SMMC-7721后,轉(zhuǎn)染p16基因的SMMC-7721細(xì)胞遷移能力較空載體對(duì)照組和空白對(duì)照組SMMC-7721細(xì)胞明顯下降;Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)分析亦顯示,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 p16基因的人肝癌 SMMC-7721細(xì)胞遷移至濾膜下表面的細(xì)胞數(shù)減少為39.5±2.72個(gè)/視野,與空載體對(duì)照組(132.4±6.73個(gè)/視野)和空白對(duì)照組(133.7±3.18個(gè)/視野)SMMC-7721細(xì)

3、胞之間有顯著性差異(P<0.05)。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)顯示,外源性p16基因?qū)肴烁伟㏒MMC-7721細(xì)胞后,轉(zhuǎn)染p16基因的SMMC-7721細(xì)胞其VEGF表達(dá)較空載體對(duì)照組和空白對(duì)照組SMMC-7721細(xì)胞減弱(P<0.05);Western blot分析顯示,外源性p16基因?qū)肴烁伟㏒MMC-7721細(xì)胞后,轉(zhuǎn)染p16基因的SMMC-7721細(xì)胞其nm23、TIMP-1表達(dá)較空載體對(duì)照組和空白對(duì)照組SMMC-7721細(xì)胞增強(qiáng)(P

4、<0.05),而其MMP-9表達(dá)則較空載體對(duì)照組和空白對(duì)照組SMMC-7721細(xì)胞減弱(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　⑴外源性p16基因?qū)肴烁伟┘?xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞,可抑制人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的體外遷移能力,減慢其運(yùn)動(dòng)能力。
　　⑵外源性p16基因?qū)肴烁伟┘?xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞可下調(diào)VEGF的表達(dá)。
　　⑶外源性p16基因?qū)肴烁伟┘?xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞可上調(diào)nm23的表達(dá)。<