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文檔簡介
1、近年的大量研究表明,生物體內的多糖具有調節(jié)機體免疫、抗腫瘤、抗氧化、降血糖和降血脂等廣泛的生理作用。中藥金櫻子(Rosa laevigata Michx),又名糖罐子,是薔薇科薔薇屬的一種野生常綠蔓性灌木的果實。在醫(yī)學上金櫻子有著廣泛的應用,早在《本草綱目》中就記載有多種功效。金櫻子在我國分布廣泛、資源豐富,其多糖含量較高,在金櫻子的諸多作用中,多糖無疑是其中的主要活性成份之一。因此,開展對金櫻子多糖(Rosa laevigata mi
2、chxpolysaccharides,RPs)的分離純化及其藥理作用的研究有著廣泛的應用前景。
本研究采用正交實驗設計,以溫度、料液比、提取時間等為變量,預測最佳工藝參數,優(yōu)化金櫻子多糖的最佳提取條件;粗提物經Sevage法脫蛋白,透析法除去小分子,乙醇沉淀,冷凍干燥,得到金櫻子多糖粉末;重新水溶解后,采用DEAE-纖維素柱分離純化,得到三個組份的多糖,經凝膠過濾色譜法,測定其分子量分布范圍。
利用RPs為受試物,進
3、行體外自由基的清除實驗,再利用實驗性高脂血癥小鼠和大鼠模型,觀察RPs及其各組分的降血脂作用。以高脂飼料持續(xù)喂小鼠2W,大鼠14W后,采血,直接測定血清的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG),高密度脂蛋白(HDL-C)含量,并由公式計算低密度脂蛋白(LDL-C)和動脈硬化指數(AI)值;采用冰凍切片,光鏡觀察大鼠動脈的形態(tài)學結構的變化。
研究結果如下:
1.浸提溫度、料液比和浸提時間對金櫻子多糖的提取率有較顯著的影響,
4、粗提最佳溫度、料液比及提取時間分別為:95℃、1:10、4h。
2.金櫻子多糖經純化分離后,所得三個組份RP1、RP2和 RP3的平均分子量分別為:8300~8600、18500~19000和11000~12500。
3.三種多糖組份對超氧陰離子自由基,羥基自由基都有顯著的清除作用,但活性強度不同。在對O2-?的清除作用中,RP2的活性最強(EC50=642.7ug/ml),而RPs對?OH清除率最高(EC50=14
5、55.1ug/ml)。在降血脂實驗中,飼喂RP2小鼠組具有顯著的降血脂活性,與高脂模型組比較,血清中的TC、TG、LDL-C含量和AI均有顯著降低(P<0.01),HDL-C含量則顯著升高(P<0.01)。在進一步的大鼠實驗中,血管的組織形態(tài)學對比表明:RP2飼喂組與高脂飲食組相比,動脈粥樣硬化病變明顯減輕(P<0.05)。
綜上所述,金櫻子多糖RP2有較顯著降脂效果,對動脈粥樣硬化可能有一定的預防作用,值得進一步深入研究和開
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