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文檔簡介
1、線蟲是種類最多的動物之一,在土壤、水源及生物體內(nèi)等環(huán)境中廣泛分布。土壤中的線蟲主要有自由生線蟲和植物寄生線蟲兩種,在植物根際都尤為密集,并因此與根際細菌有著復雜多樣的交互關系。生物菌肥是近年來研究的熱點,利用植物根際細菌為主體的生物肥料具有多效、環(huán)保、可持續(xù)等優(yōu)點,但在實際應用中遇到許多問題。自由生線蟲捕食細菌,往往造成生防細菌的損耗,影響菌肥效果,但有時也會幫助傳播菌株,擴大菌株的分布范圍;而植物線蟲則是危害農(nóng)作物健康的病原線蟲。國外
2、對自由生線蟲與細菌的關系已有不少研究,而國內(nèi)報道較為稀缺;而利用根際細菌防治植物線蟲的研究國內(nèi)外均已有不少成果。然而不論是國內(nèi)還是國外,將該兩項研究相結合的報道都很少。
本課題從番茄根際土壤中分離得到14株細菌,將實驗室現(xiàn)有菌株與其對比,得到兩株對秀麗線蟲具有一定反捕食能力的菌株,分別為橘黃假單胞菌JD37和熒光假單胞菌 P13。兩株細菌在緩慢殺線實驗中對秀麗線蟲的致死率分別達到26.12%和18.66%。與大腸桿菌 OP50
3、相比,秀麗線蟲排斥JD37菌株,且偏好P13菌株,選擇性系數(shù)分別為-0.59和0.47。經(jīng)過7天的共同培養(yǎng),JD37組線蟲大量死亡且繁殖率下降,P13組線蟲行動力略有下降,繁殖力幾乎不受影響。實驗發(fā)現(xiàn)菌株活力對其反捕食能力具有一定影響,因此推測兩株細菌的反捕食能力作用源于次級代謝產(chǎn)物,并對現(xiàn)已知主要有效產(chǎn)物進行測定??辔端嵩嚰堅囼烇@示,熒光假單胞菌P13具有產(chǎn)生HCN的能力,JD37則無法產(chǎn)生HCN;而PCR克隆結果顯示JD37、P13
4、兩株細菌均無法產(chǎn)生2,4-DAPG。分子實驗表明JD37菌株不具有產(chǎn)生任何一種已知次級代謝產(chǎn)物的能力。為將兩株細菌運用于根結線蟲防治,本課題首先對河南省新鄉(xiāng)市延津縣番茄線蟲病發(fā)地土壤進行理化性質檢測,確定土樣呈中性,可溶性鹽濃度偏高,土質粗略判斷為壤土或粘壤土。其次,灌溉實驗得出,根結線蟲在含水量為15mL/100g土/周以下時易侵染番茄,且當灌水量大于該數(shù)值,番茄植株本身的生長也會受到影響。根據(jù)以上結論設計實驗,發(fā)現(xiàn)JD37、P13菌
5、劑對根結線蟲的侵染均有一定的抑制效果,其中 P13抑制效果較JD37更佳,而JD37能更好地促進番茄生長。P13和JD37兩種菌劑與對照組相比分別使根結數(shù)減少49.10%和43.53%,番茄植株莖生長量分別比對照組高出26.41%和30.26%。
以上結果表明,JD37、P13兩株生防細菌在土壤自由生線蟲的捕食壓力下演化出不同的應對機理,其中JD37菌株能更為有效地抵抗捕食,且對植物寄生線蟲也有一定的拮抗能力,并能夠更好地幫助
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